犬の肥満細胞腫におけるc-kit変異解析とイマチニブ耐性を起こす二次変異の研究

犬肥大细胞瘤C-kit突变分析及伊马替尼耐药二次突变研究

• 批准号: 23925032
• 负责人: 中野 優子
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: 日本小動物がんセンター
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23925032/
• 关键词: 犬の肥満細胞腫; c-KIT変異; メシル酸イマチニブ

本研究は、犬の肥満細胞腫に対してc-KIT変異様式の解析、メシル酸イマチニブの奏効性およびイマチニブ耐性を引き起こす二次変異について調査することを目的とした。方法は外科切除後の病理組織もしくは細胞診サンプルの一部からゲノムDNAを抽出した。調査対象とするエクソンはc-KITの一次変異が頻発するエクソン8、9、11、そして二次変異の発生が予想されるエクソン13、14、17とした。PCRにてc-KITの特定のエクソン領域を増幅し、PCR産物のダイレクト・シーケンシングを行った。研究成果1.犬の肥満細胞腫におけるc-KIT変異解析は26例にて実施した。c-KIT変異は13例(50.0%)で確認された。変異の内訳はエクソン11のITD変異は8例、エクソン8のITD変異は2例、エクソン11の欠損変異は2例(c.1663-1671delおよびc.1666-1671del)、エクソン11の点変異(c.1676T>A)が1例であった。エクソン11の欠損変異(c.1663-1671del)およびエクソン11の点変異(c.1676T>A)はいずれも既報にて報告されていない変異であった。2.26例のうちメシル酸イマチニブ±プレドニゾロンにて治療された犬は22例で、c-KIT変異ありが11例、c-KIT変異なしが11例であった。c-KIT変異が認められた犬のメシル酸イマチニブ±プレドニゾロンの奏効率は100%(11/11)、c-KIT変異が認められなかった犬の奏効率は27.3%(3/11)であった。メシル酸イマチニブへの感受性が認められた14例の奏効期間の中央値は134日(14-855日)であった。また、部分奏効群(n=3)の奏効期間の中央値は22日、完全奏効群(n=11)の奏効期間の中央値は188日となり、両群の奏効期間に有意差が認められた(p=0.0060)。3.本研究にて新規変異として確認されたエクソン11の欠損変異(c.1663-1671del)およびエクソン11の点変異(c.1676T>A)はメシル酸イマチニブに感受性であり、これらの変異は機能獲得型変異であることが示唆された。4.c-KIT変異を有し、メシル酸イマチニブに感受性のあった4症例でイマチニブ耐性後の二次変異の検索を実施したところ、1例でエクソン14に点変異(T699I)が確認された。この変異はヒトのGISTにおけるイマチニブ耐性で報告されている点変異(T670I)と同様と考えられた。

The purpose of this study is to analyze the variation of c-KIT in dogs, and to investigate the variation of c-KIT in dogs. Methods DNA was extracted from the tissue after surgical resection. Investigation of the primary variation frequency of c-KIT: 8, 9, 11, 13, 14, 17. PCR amplification of c-KIT in specific regions, PCR product selection and selection Results 1. Analysis of c-KIT variation in 26 cases of canine fat cell swelling. 13 cases (50.0%) of c-KIT were confirmed. 8 cases of ITD variation, 2 cases of ITD variation (c.1663 - 1671 del), 1 case of ITD variation (c.1676T> A).エクソン11の欠损変异(c.1663-1671del)およびエクソン11の点変异(c.1676T>A)はいずれも既报にて报告されていない変异であった。2.26 22 cases were treated with c-KIT, 11 cases with c-KIT and 11 cases with c-KIT. The effective rate of c-KIT was 100%(11/11) and that of c-KIT was 27.3%(3/11). The sensitivity of the acid is recognized in 14 cases, and the central value of the period is 134 days (14 - 855 days). Also, the central value of the performance period of the partial performance group (n = 3) is 22 days, and the central value of the performance period of the full performance group (n = 11) is 188 days. There is an intentional difference in the performance period of the full performance group (p = 0.0060). 3. This study confirmed that the difference between the loss of the system 11 (c.1663 - 1671 del) and the difference between the loss of the system 11 (c.1676T> A) was different from the sensitivity of the system. 4. The sensitivity of c-KIT was confirmed in 4 cases, and the sensitivity of c-KIT was confirmed in 1 case. This is the first time that I have ever seen such a person.