ヘリコバクター・ピロリ菌cagY解析による発癌因子CagAと疾患との関連

幽门螺杆菌cagY分析致癌因子CagA与疾病关系

• 批准号: 23930025
• 负责人: 山川 雅希代
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: University of Fukui
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23930025/
• 关键词: ヘリコバクター・ピロリ菌; CagA; IV型分泌装置

研究の目的胃がん発症に深く関与するとされるヘリコバクター・ピロリ菌(ピロリ菌)の発癌因子の一つCagAはナノ注射針として機能するIV型分泌装置を介して胃上皮細胞内に直接注入され、宿主細胞の異常増殖を引き起こすと考えられている。近年の研究により、CagAの遺伝子多型による発癌強度の違いが明らかにされてきている。一方、IV型分泌装置の構造・分泌機構は依然不明な点が多い。本研究ではIV型分泌装置の構成遺伝子の中でもcagA同様に特徴ある繰り返し配列が認められる遺伝子cagYの解析による発癌因子CagAと疾患との関連についての解明を目的とした。研究方法以下の方法により、ピロリ菌cagYと発癌因子CagAの多型、ならびに疾患との関連を比較検討した。1.これまでのcagA解析結果を基に、cagY遺伝子について未解析ピロリ菌の培養・DNAの抽出・精製後、PCR法にてcagY遺伝子の増幅、精製をした。2.1)のPCR direct Sequence法による遺伝子解析装置から得られたデータについて、遺伝子情報処理解析ソフトGENETYXにてcagYの遺伝子配列を解析した。3.2)によって得られた各菌株の遺伝子配列をアミノ酸解析し、Multiple Aligment樹形図解析等によりcagYとcagAの多型と疾患との関連を比較検討した。研究成果本研究で解析したピロリ菌疾患別臨床分離株148株(胃癌43,胃炎56,十二指腸潰瘍49)の多型解析と疾患との関連を比較した結果、CagAの遺伝子多型に加え、新たにcagYに存在する特定領域に疾患特異的と考えられるアミノ酸配列を有していることが新しい知見として示唆される成果となった。また、さらにこの配列は、現在保有する臨床分離株の中では数少ないcagA欧米型の胃癌由来株からも関連性が示唆され、今後さらなる追究が必要と考える。

The aim of this study is to investigate the role of CagA in the development of gastric cancer, including direct injection into gastric epithelial cells, induction of abnormal proliferation of host cells, and the role of type IV secretory apparatus in the development of gastric cancer. In recent years, the study of CagA gene polymorphism has been carried out. The structure and secretion mechanism of type IV and type IV secretion devices are still unknown. The purpose of this study is to elucidate the association between CagA and disease in the molecular structure of type IV secretory apparatus and its identity. Methods: The following methods were used to investigate the relationship between CagY and CagA polymorphism and disease. 1. Based on the analysis result of cagA, cagY gene was extracted from culture of unanalyzed bacteria, DNA was extracted and purified, and cagY gene was amplified and purified by PCR method. 2.1)'s PCR direct Sequence method enables the genetic analysis device to obtain data and analyze the genetic sequence of cagY in the genetic information processing and analysis software GENETYX. 3.2) Comparison of genetic sequences of cagY and cagA strains, acid analysis, Multiple alignment tree analysis, etc. Results In this study, we analyzed 148 clinical isolates of bacterial diseases (gastric cancer 43, gastritis 56, duodenal ulcer 49) and compared the results of polymorphism analysis and disease association. The results showed that CagA gene polymorphism increased and new CagY gene existed, and the results showed that there were disease-specific diseases in specific domains. The number of clinical isolates currently in existence is small, and the relationship between the European gastric cancer origin strains and their alignment should be investigated in the future.