H.pyloriのcagE,cagY解析による発癌因子CagAと疾患との関連

H. pylori cagE和cagY分析致癌因子CagA与疾病的关系

• 批准号: 24930027
• 负责人: 山川 雅希代
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: University of Fukui
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24930027/
• 关键词: ヘリコバクター・ピロリ菌; CagA; IV型分泌装置

研究の目的胃がん発症に深く関与するとされるヘリコバクター・ピロリ菌(ピロリ菌)の発癌因子の一つCagAはナノ注射針として機能するIV型分泌装置を介して胃上皮細胞内に直接注入され、宿主細胞の異常増殖を引き起こすと考えられている。近年の研究により、CagAの遺伝子多型による発癌強度の違いが明らかにされてきている。一方、IV型分泌装置の構造・分泌機構は依然不明な点が多い。本研究では、IV型分泌装置の6構成遺伝子の中で解析を進めてきた、cagAのように特徴ある繰り返し配列が認められる遺伝子cagYと、炎症性活性因子IL-8産生に関わる重要な遺伝子とされているcagEに着目し、CagA遺伝子多型、疾患との関連の解明を目的とした。研究方法1.過去のcagA解析結果を基に、cagYに加えcagEについて未解析ピロリ菌の培養・DNAの抽出・精製後、PCR法にて遺伝子の増幅、精製をした。2.1)のPCR direct Sequence法による遺伝子解析装置から得られたデータを遺伝子情報処理解析ソフトGENETYXにて配列解析した。3.2)によって得られた遺伝子配列をアミノ酸解析し、Multiple Aligment樹形図解析等によりcagE,cagYとcagAの多型と疾患との関連を比較検討した。研究成果GenBankに登録済みの遺伝子を含め本研究において解析したピロリ菌疾患別臨床分離株、計90株(胃癌16,胃炎32,十二指腸潰瘍42)のcagE,cagYとcagA遺伝子の多型、ならびに疾患との関連を比較した結果、cagY多型に加え、株間で配列の相同性が高いcagEにもcagA多型と関連性が示唆される特徴的なアミノ残基の存在が明らかとなった。また、この配列は欧米型cagAでは稀とされる胃癌由来株にも認められ、その関連については今後さらなる追究が必要と考える。

The aim of this study is to investigate the role of CagA in the development of gastric cancer, including direct injection into gastric epithelial cells, induction of abnormal proliferation of host cells, and the role of type IV secretory apparatus in the development of gastric cancer. In recent years, the study of CagA gene polymorphism has been carried out. The structure and secretion mechanism of type IV and type IV secretion devices are still unknown. The aim of this study is to elucidate the relationship between the six component genes of type IV secretory apparatus and the expression of cagA gene polymorphism and disease. Methods 1. The analysis results of cagA in the past were based on the culture, extraction and purification of DNA, amplification and purification of DNA by PCR. 2.1) PCR direct Sequence method is used to analyze gene sequences. 3.2) Comparative analysis of polytype and disease relationships between cagE,cagY and cagA. The results of this study include the analysis of cagE, cagY and cagA gene polymorphisms in 90 clinical isolates (gastric cancer 16, gastritis 32, duodenal ulcer 42), and the comparison of their association with diseases. The results show that cagY polymorphism increases, and the identity between strains is high. The relationship between gastric cancer and its origin should be investigated in the future