ヒト表皮角化細胞を用いたシタラビンによる斑状丘疹性皮疹の発生機序の解明

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【目的】本研究は, シタラビンによる斑状丘疹性皮疹の発生機序の解明および予防方法の検討を行うことを目的とし, 培養細胞を用いた検討を行った.【方法】ヒト表皮角化細胞(HaCaT)細胞を用い, シタラビンによる皮膚細胞に対する影響について, WST-8法, リアルタイムPCR, western blot法を用いて, 細胞障害, 炎症系シグナルやアポトーシスに関連した各種項目について検討を行った. シタラビンは医療用医薬品のキロサイド®を用いた.【結果】以下の結果が得られた.1. 0.5, 1, 2.5, 5, 10mg/Lのシタラビン添加培地での培養後, WST-8法で細胞数の評価を行った. 24時間培養にて, 各々20, 40, 50, 60, 70%程度の有意な細胞数減少が見られた. sttatic共存下での差は見られなかった.2. 炎症系シグナルであるIL-6, IL-1β, TNF-α, β-FGFについて上記濃度でのmRNAの発現量の変動について調べた. 全ての因子において, 濃度依存的な発現量の有意な増加が見られた. 特に, IL-1βにおいては1～2.5mg/Lの濃度間の発現量変動が大きく見られた.3. 皮膚の恒常性に関わる因子とされるSignal Transducer and Activator of Transcription(STAT)3およびその下流因子, アポトーシス関連因子として, p38, PARP, JNKタンパクについて, 上記濃度でのタンパク発現量変動について調べた. STAT3は2.5mg/L以上で, PARPは5mg/L以上でタンパクの発現量が大きく低下したp38, JNKは変動が見られなかった.【考察】上記結果より, HaCaT細胞の各種因子に対するシタラビンの濃度依存的な影響が確認できた. また, 一定の濃度を超えるとその変動は著しく, HaCaT細胞の生存に大きな影響を与えると考えられた. 今回の結果から, シタラビンによる皮膚細胞に対する影響として, 各種炎症系シグナルを介した細胞障害, STAT3抑制による細胞障害が濃度依存的に引き起こされており, これらが斑状丘疹性皮疹の発生機序に関与している可能性が初めて示唆された.