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細胞融合制御因子(FRP-1/CO98)のリガンドの同定

细胞融合调节剂配体的鉴定（FRP-1/CO98）

基本信息

批准号：
08770212
负责人：
河野光雄
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Mie University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770212/
关键词：
細胞融合細胞融合制御因子 FRP CD98 リガンド接着因子

项目摘要

本研究においては、細胞接着因子としての機能を有し、細胞融合制御システムの一部として存在するFusion Regulatory Protein-1(FRP-1)に対するリガンドの同定を目的に、まず、アフィニティーカラムの作製のためのプローブ作りを行った。(1)分泌蛋白としてのFRP-1(sFRP-1)を構成的に発現する細胞系の作製シグナルト-クエンス(PIV2-F)とTagをN-末端にもち、その後ろに、FRP-1のExtra celler domainを発現するように構築したプラスミドDNAをHela、Cos 7、L929細胞にトランスフェクトしネオマイシンでセレクションをかけて、sFRP-1構成的発現細胞系の樹立を計った。この3種の細胞のなかでFRP-1の発現がみられたのはL細胞のみであり、その発現量は非常に少なく、そのDistributionは、細胞内、細胞表面に存在したが、培養液中には分泌されてこなかった。また、得られた細胞株のなかには、単独で多核巨細胞を形成するものがいくつか見つかった。これらの事象の解決のために、シグナルシークエンスをCD5に変えたコンストラクトを構築し、Lac Switchを用いたInducible Expression系を作製し解析中である。(2)Inducible Expression系アフィニティーカラムの作製には、大量のsFRP-1が必要となるためCos細胞での構成的発現が望ましい。(1)の系においては、sFRP-1がDominant negativeとして働くことが示唆された。すでにL細胞においては上記2種のコンストラクトを用いてこの系で解析中であり、Cos細胞、HeLa細胞においても現在作製中である。

In this study, Fusion Regulatory Protein-1(FRP-1) was found to be a part of the cell fusion control system, and to function as a regulator of cell fusion. (1)Construction of a cell line consisting of PIV-2-F, Tag, N-terminal region, post-processing region, and Extra cell-domain of FRP-1. Construction of a cell line consisting of Hela, Cos 7, and L929 cells. The three kinds of FRP-1 cells were found in very small amounts, distributed in very small amounts, and secreted in culture medium. The cell lines were isolated and multicellular giant cells were formed. This is the first time I've ever been able to do this. (2)Inducible Expression is the expression of sFRP-1 in Cos cells. (1)SFRP-1 is a Dominant negative. In the analysis of L cells, Cos cells and HeLa cells, there are two kinds of cell types.