くすりの相互作用と安全性の予測を目的とした組換えヒトP450酵素の応用

应用重组人P450酶预测药物相互作用和安全性

基本信息

批准号：
08770302
负责人：
山崎浩史
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Osaka Prefectural Institute of Public Health
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

併用されたくすりの相互作用により、臨床上重篤な副作用が引き起こされた医療事故が契機となり、薬物相互作用の機序とその予測に関する研究が注目を集めている。現在知られている薬物相互作用の多くは、くすりの代謝過程において、チトクロームP450酵素(以下P450又はCYP)の阻害によるものとされている。そこでP450酵素の代謝阻害と酵素誘導に焦点をしぼり、主に大腸菌に発現させた精製ヒトP450酵素を用いる再構成系を用いて研究を進め、ヒト肝ミクロゾームと対比させることにより以下の成果を得た。1.ヒト肝ミクロゾームの主要なP450分子種であるCYP3A4は、P450還元酵素、チトクロームb_5(b_5)、混合リン脂質、コール酸を用いる再構成系により、還元型グルタチオン、塩化マグネシウム存在下、HEPES緩衝液中で反応させることにより、肝ミクロゾームに相当する十分な触媒活性を示すことが明らかになった。b_5は電子伝達系に含まれるヘム蛋白であるが、そのCYP3A4触媒活性促進作用は、電子の流れを介することなく、CYP3A4とP450還元酵素のとの複合体形成にb_5が関与していると推察され、b_5を要求する他のP450分子種、例えば、CYP2E1に対する活性促進作用機序とは異なることが示唆された。2.臨床上相反する薬物相互作用に関する報告があるマクロライド系抗生物質のうち、エリスロマイシンとその誘導体のP450酵素の阻害、代謝を受ける分子種及び誘導作用について検討した。エリスロマイシンはラットとヒトのCYP3A酵素によって代謝を受け、阻害作用を示すのみならず、CYP3Aの誘導作用も合わせ持つことが判明し、この程度の違いが相反する報告の一因となることが示唆される。

与组合使用的药物之间相互作用之间相互作用的医疗事故导致了严重的临床副作用，并研究了药物相互作用及其预测的机制引起了人们的注意。人们认为，许多当前已知的药物相互作用都是由医学代谢过程中抑制细胞色素P450酶（以下称为P450或CYP）引起的。因此，我们专注于抑制代谢和诱导P450酶，并使用重新制定系统使用纯化的人P450酶进行了研究，主要在大肠杆菌中表达，并将其与人肝微粒体进行了比较，我们获得了以下结果。 1。CYP3A4是人肝微粒体的主要p450分子物种，已被证明表现出足够的催化活性，通过使用p450还原酶，cyto Chrome bs_5（blossip andto Chrome bymome bymome bymome by_5），通过减少谷胱甘肽和氯化物的氯化物在HEPES缓冲液中反应在HEPES缓冲液中反应。酸。 B_5是电子传输系统中包含的血红素蛋白，其催化活性促进了CYP3A4，而没有电子流，被认为与CYP3A4和P450还原酶之间的复合物形成有关，这表明它与其他需要P450分子物种的机制不同，而其他需要P450分子的机制，而这些p450分子的机制需要B_5，例如b_5，例如CYP2E。 2。在据报道是临床上相反的药物相互作用的大环内酯类抗生素中，研究了红霉素及其衍生物的抑制和代谢，研究了它们的诱导作用。红霉素被大鼠和人CYP3A酶代谢，不仅表现出抑制作用，而且还具有CYP3A的诱导作用，这表明这种差异水平会导致报告相互矛盾的报告。