くすりの相互作用と安全性の予測を目的とした組換えヒトP450酵素の応用

应用重组人P450酶预测药物相互作用和安全性

• 批准号: 08770302
• 负责人: 山崎 浩史
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Osaka Prefectural Institute of Public Health
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770302/
• 关键词: チトクロームP450酵素; チトクロームb_5; 大腸菌; ヒト肝ミクロゾーム; CYP3A4; 薬物相互作用; エリスロマイシン; リコンビナント

併用されたくすりの相互作用により、臨床上重篤な副作用が引き起こされた医療事故が契機となり、薬物相互作用の機序とその予測に関する研究が注目を集めている。現在知られている薬物相互作用の多くは、くすりの代謝過程において、チトクロームP450酵素(以下P450又はCYP)の阻害によるものとされている。そこでP450酵素の代謝阻害と酵素誘導に焦点をしぼり、主に大腸菌に発現させた精製ヒトP450酵素を用いる再構成系を用いて研究を進め、ヒト肝ミクロゾームと対比させることにより以下の成果を得た。1.ヒト肝ミクロゾームの主要なP450分子種であるCYP3A4は、P450還元酵素、チトクロームb_5(b_5)、混合リン脂質、コール酸を用いる再構成系により、還元型グルタチオン、塩化マグネシウム存在下、HEPES緩衝液中で反応させることにより、肝ミクロゾームに相当する十分な触媒活性を示すことが明らかになった。b_5は電子伝達系に含まれるヘム蛋白であるが、そのCYP3A4触媒活性促進作用は、電子の流れを介することなく、CYP3A4とP450還元酵素のとの複合体形成にb_5が関与していると推察され、b_5を要求する他のP450分子種、例えば、CYP2E1に対する活性促進作用機序とは異なることが示唆された。2.臨床上相反する薬物相互作用に関する報告があるマクロライド系抗生物質のうち、エリスロマイシンとその誘導体のP450酵素の阻害、代謝を受ける分子種及び誘導作用について検討した。エリスロマイシンはラットとヒトのCYP3A酵素によって代謝を受け、阻害作用を示すのみならず、CYP3Aの誘導作用も合わせ持つことが判明し、この程度の違いが相反する報告の一因となることが示唆される。

The study on the mechanism of drug interaction and prediction of side effects caused by medical accidents has attracted much attention. It is now known that there are many ways in which chemical interactions can be prevented by metabolic processes, such as P450 enzymes (hereinafter P450 and CYP). P450 enzyme metabolism inhibition enzyme induction focus, main coliform production, purification, re-use of the system to study progress, liver, liver, kidney, kidney, 1. CYP3A4, CYP450, CYP450, CYP b_5 electron transfer system contains CYP3A4 catalytic activity promotion mechanism, electron flow mediation mechanism, CYP3A4 and P450 reduction enzyme complex formation mechanism, b_5 interaction mechanism and other P450 molecular species, e.g. CYP2E1 interaction mechanism. 2. Clinical reports on drug interactions between antibiotics and P450 enzyme inhibition, metabolism, and induction CYP3A enzyme metabolism, inhibition, CYP3A induction, inhibition, inhibition, inhibition

项目成果

Yamazaki,H.et al.: "7-Ethoxycoumarin O-deethylation catalyzed by cytochromes P450 1A2 and 2E1 in human liver microsomes." Biochcm.Pharmacol.51. 313-319 (1996)

Yamazaki,H.et al.：“人肝微粒体中细胞色素 P450 1A2 和 2E1 催化的 7-乙氧基香豆素 O-脱乙基化。”

Yamazaki,H.et al.: "Roles of cytochrome b5 in the oxidation of testosterone and nifedipine by recombinant cytochrome P450 3A4 and by human liver microsomes" Arch.Biochem.Biophys.325. 174-182 (1996)

Yamazaki,H.et al.：“细胞色素 b5 在重组细胞色素 P450 3A4 和人肝微粒体氧化睾酮和硝苯地平中的作用”Arch.Biochem.Biophys.325。

Yamazaki,H.et al.: "Effects of erythromycin and roxithromycin on oxidation of testosterone and nifedipine catalrzed by CYP3A4 in human liver microsomes" J.Toxicol.Sci.21. 215-226 (1996)

Yamazaki,H.et al.：“红霉素和罗红霉素对人肝微粒体中 CYP3A4 催化的睾酮和硝苯地平氧化的影响”J.Toxicol.Sci.21。

Yamazaki,H.et al.: "Lack of electron transfer from cytochrome b5 in stimulation of catalytic activities of cytochrome P450 3A4. Characterization of a reconstituted cytochrome P450 3A4/NADPH-cytochrome P450 reductase system and studies with apocytochrome b

Yamazaki,H.et al.：“在刺激细胞色素 P450 3A4 的催化活性时，缺乏来自细胞色素 b5 的电子转移。重组细胞色素 P450 3A4/NADPH-细胞色素 P450 还原酶系统的表征以及脱辅基细胞色素 b 的研究

Yamazaki,H.et al.: "Requirements for cytochrome b5 in the oxidation of 7-ethoxycoumarin, chlorzoxazone,aniline,and N-nitrosodimethylamine by recombinant cytochrome P450 2E1 and by human liver microsomes." Biochem.Pharmacol.52. 301-309 (1996)

Yamazaki, H.et al.：“重组细胞色素 P450 2E1 和人肝微粒体氧化 7-乙氧基香豆素、氯唑沙宗、苯胺和 N-亚硝基二甲胺时对细胞色素 b5 的要求。”