バキュロウイルス発現系によるひと乳頭腫ウイルス3型のウイルス様粒子の産生

使用杆状病毒表达系统生产 3 型人乳头瘤病毒的病毒样颗粒

• 批准号: 08770686
• 负责人: 川瀬 正昭
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770686/
• 关键词: パピローマウイルス; バキュロウイルス; ウイルス様粒子

目的:通常の扁平疣贅組織からはヒト乳頭腫ウイルス3型(HPV3)が多く認められる.研究の目的は,扁平疣贅患者におけるHPV3カプシド蛋白L1に対する抗体をELISA法で測定することで疾患との相関をみることである.今回は第一段階としてバキュロ発現系を利用して抗原として利用できるHPV3のウイルス様粒子を産生することを目的とする.方法:まずバキュロウイルス発現系のベクターであるpVL1392のマルチクローニング部位にmajor capsld protelnをコードするL1のDNAをクローニングした.コトランスフェクション反応後プラークアッセイ法にて組換えAcHPV3L1をセレクトし,HPV3のL1カプシド蛋白をバキュロウイルス-昆虫細胞発現系で大量に発現させた.自律的にウイルス様粒子が形成される.塩化セシウム平衡遠心法で精製後,ネガティブ染色で電子顕微鏡にて観察する.結論:ネガティブ染色でHPV5の場合と同様にウイルス粒子とそっくりな直径約56nmのウイルス様粒子が見られた.個々のカプソメアも観察できた.

Objective: To identify HPV type 3 in common flat wart tissue. The aim of the study was to detect antibodies to HPV3 protein L1 in patients with flat warts by ELISA. The first step is to make use of the antigen and the particle of HPV3. Method: DNA sequence of pVL1392 and its major capsld proteln. AcHPV 3L1 protein was found in large quantities in insect cell development systems. Self-regulating particles are formed. After the purification of the equilibrium telecentre, the dye was used for electron microscope observation. Conclusion: HPV-5 particles with diameters of about 56nm were found in the same cases. The best way to find out.