産科的DIC(常位胎盤早期剥離)におけるカルシウムプロテアーゼの動態

产科 DIC（胎盘早剥）中钙蛋白酶的动态变化

• 批准号: 08771347
• 负责人: 尾崎 康彦
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771347/
• 关键词: カルパイン; DIC; 常位胎盤早期剥離; カルシウムプロテアーゼ

健常及び常位胎盤早期剥離症例(早剥)胎盤のカルパインの存在と動態を以下の実験法によって比較検討した。(1)胎盤内カルパイン活性の検討常法に従い、娩出された胎盤を速やかにカルパイン精製液中でホモジナイズした後に遠心処理し、上清を硫安カット及び透析後、DEAEセファロースカラムにてカルパインを含むフラクションを得た。精製した検体について、カゼインを基質とした分解活性によりカルパイン活性を簡易的に測定したところ、早剥例に残存カルパインによるカゼイン分解量の低下が認められた。当教室で作製した各種抗カルパイン抗体を用い、以下の実験によりカルパインの検索を試み、μ-及びm-カルパインの関与、前駆体及び活性型カルパインの関与やカルシウム感受性を検討した。尚、特異的反応である事を抗原ペプチドによる抗体吸収実験で確認した。(2)胎盤内カルパインのSDS-PAGE・ウエスタンブロッテッング法による測定健常例に比べ早剥例にμ-カルパイン80Kの前駆型に対する抗体の染色性の低下が認められた。(3)胎盤の免疫組織染色によるカルパイン動態の解析健常例に比べ早剥例にμ-カルパイン80Kの前駆型に対する抗体の絨毛細胞の核への染色性の低下が認められた。また、同連続切片を用いた、TUNEL法では明らかなアポトーシスの存在は観察されなかった。以上より、ヒト胎盤に存在するμ-カルパインが常位胎盤早期剥離の病態において活性化されている可能性が示唆された。現在カルパインの活性化の機序として、低酸素状態の関与を想定し培養絨毛細胞の低酸素モデルを用いて検討中である。

Health cases often and び often a placenta early stripping (strip) early placenta の カ ル パ イ ン の exist under dynamic を と の be 験 method に よ っ て compare beg し 検 た. (1) in placenta カ ル パ イ ン active の beg often method 検 に 従 い, childbirth さ れ た placenta を speed や か に カ ル パ イ ン refined liquid of で ホ モ ジ ナ イ ズ し た after に telecentric 処 し, supernatant を sulfur Ann カ ッ ト and び after dialysis, DEAE セ フ ァ ロ ー ス カ ラ ム に て カ ル パ イ ン を containing む フ ラ ク シ ョ ン を た. Refined し た 検 body に つ い て, カ ゼ イ ン を matrix と し た decomposition activity に よ り カ ル パ イ ン determination of active を simple に し た と こ ろ, abruptions に residual カ ル パ イ ン に よ る カ ゼ イ ン decomposition low quantity の が recognize め ら れ た. When the classroom で cropping し た various resistance カ ル パ イ ン antibody を い, the following の be 験 に よ り カ ル パ イ ン の 検 cable を try み, mu - and び m - カ ル パ イ ン の masato and type, the former 駆 body and び active カ ル パ イ ン の masato with や カ ル シ ウ ム susceptibility を beg し 検 た. Experiments on the absorption of specific and antigenic ペプチドによる antibodies confirmed で た. (2) in placenta カ ル パ イ ン の sds-page, ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ テ ッ ン グ method に よ る determination of health now に strip case earlier than べ に mu - カ ル パ イ ン 80 k type before の 駆 に す seaborne る antibody の dyeing の low が recognize め ら れ た. (3) the placenta の immunohistochemical staining に よ る カ ル パ イ ン dynamic の health ordinance に strip case earlier than べ に mu - カ ル パ イ ン 80 k type before の 駆 に す seaborne る antibody の hair cells の nuclear へ の dyeing の low が recognize め ら れ た. With even use 続 slice を い ま た, た, TUNEL method で は Ming ら か な ア ポ ト ー シ ス の is は 観 examine さ れ な か っ た. Exist above よ り, ヒ ト placenta に す る mu - カ ル パ イ ン が often a placenta early stripping の pathological に お い て activeness さ れ て い が る possibility in stopping さ れ た. Now カ ル パ イ ン の activeness の machine sequence と し て, low acid element state の masato and を し training scenarios villi cells の low acid element モ デ ル を with い て 検 beg in で あ る.

项目成果

Zhen-Qiu Liu.: "Proteolytic processing of nuclear factor kB by calpain in vitro" FEBS Lett.385. 109-113 (1996)

刘振秋：“体外钙蛋白酶对核因子 kB 的蛋白水解加工”FEBS Lett.385。