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軸索切断後の網膜神経細胞の変性抑止と軸索再生に関する研究

轴索切断术后抑制视网膜神经元变性和轴突再生的研究

基本信息

批准号：
08771506
负责人：
高野雅彦
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Yokohama City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

熟成哺乳動物としてラットを用い、網膜を摘出培養し、網膜内の生存神経細胞と再生神経突起を観察することで神経再生促進因子の効果を検討した。あらかじめ上丘より蛍光色素DiIを用いて逆行性染色を行い、網膜神経節細胞を標識したのち、コラーゲン培養法をちいて無血清培養液にて網膜組織を培養した。この培養系において蛍光色素により標識された細胞が培養網膜において観察され、一部は培養中も生存できることを確認した。また、この標識細胞から神経突起が再生していること、抗Thy1抗体により染色されることからこの再生突起は網膜神経節細胞の再生突起であることを確認した。さらにこの培養液に各種の神経栄養因子を添加し、その網膜内の神経節細胞の変性過程を蛍光顕微鏡下で観察検討した。この研究から神経栄養因子のうち神経成長因子('nerve growth factor:NGF)、脳由来神経栄養因子(brain-derived neurotrophic factor:BDNF)およびニューロトロフィン-4(neurotrophin-4:NT-4)に神経変性抑止効果があることを見いだした。またこれらの物質により再生突起の増加が観察され、神経再生促進効果も確認できた。今後もこの培養系をもちい、培養液中に様々な物質を添加して成熟哺乳動物網膜の神経再生を解析すること、さらにこれら変性抑止因子、神経再生促進因子を生体系において応用し、中枢神経細胞からの軸索再生機構について研究を進める予定である。

In mature mammals, the effects of neural regeneration promoting factors are studied by extracting and culturing neural cells and regenerating neural processes in the retina. The retinal ganglion cells were identified by retrograde staining and cultured in serum-free medium. The cultured cells were identified by fluorescent pigments, and the survival of some cultured cells was confirmed. The cells labeled with Thy-1 were identified by staining for the cells labeled with Thy-1 and the cells labeled with Thy-1. In addition to various neurotrophic factors in the culture medium, the changes of neuroganglion cells in the retina were observed under light microscope. This study included neurotrophic factors such as nerve growth factor (NGF), brain-derived neurotrophic factor (BDNF), and neurotrophic inhibitory factors such as neurotrophin-4 (NT-4). The increase of the regeneration of the substance and the recognition of the effect of the regeneration of the nerve In the future, the culture system, the addition of substances to the culture medium, the analysis of neural regeneration in mature mammals, the use of different inhibitors, and the promotion of neural regeneration in the production system, and the research on the axonal regeneration mechanism of central neurons will be carried out.