耐熱性古細菌由来のシャペロニン蛋白質の性質決定

热稳定古菌伴侣蛋白的表征

• 批准号: 08780627
• 负责人: 溝端 知宏
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08780627/
• 关键词: 分子シャペロン; 古細菌; 超好熱性; シャペロニン; 熱ショック蛋白質

本研究では耐熱性を持つ細菌内における蛋白質の構造形成反応に関する知見を得るため,超好熱性古細菌Pyrococcus furiosus由来のシャペロニン蛋白質の均一精製及びその性質の解明を試みた。なお,本蛋白質の遺伝子はすでに得られており,今回の研究では大腸菌内でその遺伝子を発現させたものからシャペロニンを均一に精製し,その基本的な性質決定を行った。Pyrococcus furiosus由来のシャペロニン蛋白質は大腸菌内で可溶蛋白質として発現され,90℃の熱処理,硫安分画,及び数種類のカラムクロマトグラフィーにより均一に精製された。電気泳動分析によりPyrococcus furiosus由来のシャペロニンはサブユニット分子量約5万6千のポリペプチド鎖からなり,またゲル濾過カラムクロマトグラフィー分析から室温では本蛋白質は6から8量体のオリゴマーを形成していることが明らかになった。不思議なことに,本蛋白質は精製途中にN末端部分がプロテアーゼの作用を受けやすいことがアミノ酸配列分析から明らかになり,好熱性細菌由来の蛋白質にしては意外にも不安定な一面が明らかになった。更に興味深いことに今回精製されたシャペロニンは,シャペロニンの基礎的な性質の一つであるATPアーゼ活性は観測されなかった。今後の実験の方針として,実際の蛋白質の構造形成反応における効果の有無を確かめること,更にシャペロニンとしての効果を発現する際に今回精製されたシャペロニン蛋白質が他の補助因子を必要とするかどうかを明らかにしていく予定である。

In this study, antifungal protein was produced in bacteria to form antifungal Pyrococcus furiosus. The origin of antifungal protein was homogenized and purified, and the results showed that the protein was purified. This protein was used to determine the quality of the bacteria. This time, the results of the study showed that the bacteria in the bacteria were homogenized, and the basic sexual decisions were made. The reason for Pyrococcus furiosus is that the soluble protein in bacteria is not soluble. The temperature is 90 ℃, the temperature is 90 ℃, the thioampere fractionation, and the concentration of thioampere is very high. The origin of electrophoretic analysis (Pyrococcus furiosus) is that the molecular weight is about 56,000. The molecular weight is about 56,000. The molecular weight of this protein is 6% and 8%. The molecular weight of this protein is 6% and 8%. If you don't think about it, the protein has an effect on the N-terminal part of the protein on the way. It is affected by acid collocation analysis. The cause of the bacteria is protein, protein, accident, instability, instability, and so on. This time, I have a deep taste. This time, I have a lot of fun. I don't know. I don't know. In the future, you will find that there is a negative effect on the quality of the protein. In the future, you will find that there is a negative effect on the quality of the protein. In the future, you will need to know that there is a negative impact on the quality of the protein, and that you will know that it is necessary to determine the effect of the protein.