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シャペロニンGroE存在下でのフォールディング反応条件を規定する分子機構の解明

シャペロニンGroE存在下でのフォールディング反応条件を規定する分子機構の解明
阐明伴侣蛋白 GroE 存在下调节折叠反应条件的分子机制
批准号:
12780497
负责人:
溝端 知宏
金额:
$1.47万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份:
2000
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
2000 至 2001

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
前年度までの実験において,GrbELのアピカルドメインにトリプトファン残基を導入したGroELR231W変異体がATPや補助蛋白質のGroES存在下で構造変化を反映する多数の蛍光強度変化を示すことを解明した。本年度ではこの結果を受けGroELR231W変異体を用いて観測することができた構造変化がGroELの機能的性質から提唱されているサイクル反応機構とどのような関連性を持つのかを詳細に解析するため,GroELの機能に何らかの影響を及ぼす「機能障害」型の変異体をGroELR231W変異体にさらに導入し,この機能障害によりR231W由来の蛍光強度変化がどのように影響されるのかを詳細に解析する実験を行った。数種類の機能障害変異体とGroELR231W変異体との2重変異体を作成し,基礎的性格付けを行った結果,GroELC138W変異体との組み合わせにおいて興味深い結果を得ることができた。GroELC138W変異はGroELに温度依存的性質をもたらす変異で,この変異体は37℃では全く野生型と変わらない性質を持つが25℃では結合した基質蛋臼質分子を再び溶液に放出する直前の段階で反応が停止する性質を示す。この変異体とR231W変異体を組み合わせた2重変異体は温度に依存してトリプトファン由来の蛍光変化が大きく異なることを解明した。このことよりさらに,GroELの反応機構において標的蛋白質を溶液中に放出するという大変重要なステップに関与している構造変化を同定することに成功した。,
英文摘要
前年度までの実験において,GrbELのアピカルドメインにトリプトファン残基を導入したGroELR231W変異体がATPや補助蛋白質のGroES存在下で構造変化を反映する多数の蛍光強度変化を示すことを解明した。本年度ではこの結果を受けGroELR231W変異体を用いて観測することができた構造変化がGroELの機能的性質から提唱されているサイクル反応機構とどのような関連性を持つのかを詳細に解析するため,GroELの機能に何らかの影響を及ぼす「機能障害」型の変異体をGroELR231W変異体にさらに導入し,この機能障害によりR231W由来の蛍光強度変化がどのように影響されるのかを詳細に解析する実験を行った。数種類の機能障害変異体とGroELR231W変異体との2重変異体を作成し,基礎的性格付けを行った結果,GroELC138W変異体との組み合わせにおいて興味深い結果を得ることができた。GroELC138W変異はGroELに温度依存的性質をもたらす変異で,この変異体は37℃では全く野生型と変わらない性質を持つが25℃では結合した基質蛋臼質分子を再び溶液に放出する直前の段階で反応が停止する性質を示す。この変異体とR231W変異体を組み合わせた2重変異体は温度に依存してトリプトファン由来の蛍光変化が大きく異なることを解明した。このことよりさらに,GroELの反応機構において標的蛋白質を溶液中に放出するという大変重要なステップに関与している構造変化を同定することに成功した。,
期刊论文(4)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
溝端知宏, 河田康志: "分子シャペロンGroEの機能を支えるコンフォメーション変化"生化学. 73巻5号. 361-366 (2001)
Tomohiro Mizobata、Yasushi Kawata:“支持分子伴侣 GroE 功能的构象变化”《生物化学》第 73 卷,第 5 期。361-366 (2001)
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
Mizobata,T. et al.: "Refolding of Target Proteins from a "Rigid" Mutant Chaperonin Demonstrates a Minimal Mechanism of Chaperonin Binding and Release"The Journal of Biological Chemistry. 275・33. 25600-25607 (2000)
Mizobata, T. 等人:““刚性”突变伴侣蛋白的重新折叠展示了伴侣蛋白结合和释放的最小机制”《生物化学杂志》275・33 (2000)。
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
変異型GroELを用いたシャペロニンの標的蛋白質結合メカニズムの解析
  • 批准号:
    10780369
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 资助金额:
    $1.02万
  • 财政年份:
    1998
  • 负责人:
    溝端 知宏
  • 依托单位:
耐熱性古細菌由来のシャペロニン蛋白質の性質決定
  • 批准号:
    08780627
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 资助金额:
    $0.51万
  • 财政年份:
    1996
  • 负责人:
    溝端 知宏
  • 依托单位:
シャペロニン蛋白質の作用機構に関する速度論的解析
  • 批准号:
    07858070
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 资助金额:
    $0.58万
  • 财政年份:
    1995
  • 负责人:
    溝端 知宏
  • 依托单位:
国内基金
海外基金
伴侣蛋白GroEL/ES调控大肠杆菌间IncX3-NDM质粒水平转移的机制研究
  • 批准号:
  • 项目类别:
    省市级项目
  • 资助金额:
    --
  • 批准年份:
    2024
  • 负责人:
    李一鸣
  • 依托单位:
梅毒 GroEL 蛋白经 TLR4/MyD88/NF- κB 途径激活 NLRP3 炎症小体及活化DC 细胞的研究
生殖支原体GroEL蛋白经TLR4途径介导巨噬细胞焦亡的分子机制
  • 批准号:
    2023JJ60055
  • 项目类别:
    省市级项目
  • 资助金额:
    --
  • 批准年份:
    2023
  • 负责人:
    陈丽
  • 依托单位:
鸡毒支原体HSP60(GroEL)蛋白诱导DF-1细胞凋亡的分子机制