スカベンジャー受容体活性部位を用いた血液浄化材料の開発

利用清道夫受体活性位点开发血液净化材料

基本信息

批准号：
08780833
负责人：
北條裕信
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Osaka City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

マクロファージに存在するスカベンジャー受容体は、変性LDLなどの体内の不要物を取り込み、処理する機能を有する。そこで、血液中から変性LDLを除く新規の血液浄化材料を開発するため、ヒトスカベンジャー受容体の変性LDL結合部位(HSR(323-341))のモデルペプチドの合成を行った。この部位は、コラーゲン様のアミノ酸配列を持つため、トリプルヘリックス構造の形成がその機能の発現に必須であると考えられる。そこで、HSR(323-341)の配列のN末端側にコラーゲン配列(Pro-Gly-Hyp)6を導入したペプチドを固相法により合成した。さらに、ペプチドチオエステルを用いたセグメント縮合法を応用し、N末端側で三本のペプチド鎖を架橋して立体構造の安定化をはかった。得られたペプチドは、円二色性スペクトル、熱測定などから安定なトリプルヘリックス構造を形成していることが明らかとなった。また、二次元NMRスペクトル上でもトリプルヘリックス構造の存在を示唆するシグナルが観測された。今後、各シグナルの帰属を行い、どの程度トリプルヘリックスが形成されているのか、定量的に見積もってゆく予定である。また、このペプチドをN末端側でアガロースビーズの上に固定化し、変性LDL吸着能を検証した。その結果、このビーズには、変性LDLが非特異的に吸着してしまうため、固定化したペプチドの効果を測定することが困難であることが明らかとなった。今後、固定化に用いる担体とペプチドとの間のスペーサーの最適化などを検討し、血液浄化材料としての応用をはかってゆく予定である。

巨噬细胞中存在的清道夫受体具有摄取的功能和治疗体内不需要的物质，例如变性的LDL。因此，为了开发一种从血液中去除变性LDL的新型血液净化材料，我们合成了人类清道夫受体的变性LDL结合位点的模型肽（HSR（HSR（323-341）））。由于该位点具有胶原蛋白样氨基酸序列，因此认为三重螺旋结构的形成对于表达其功能至关重要。因此，通过固相方法合成了胶原蛋白序列（pro-hyp）6的肽（pro-hyp）6（323-341）的N端（323-341）。此外，应用了一种使用肽硫酯的段凝结方法，以通过在N末端交联三个肽链来稳定三维构象。据揭示，获得的肽从圆形二分法光谱和热测量中形成了稳定的三重螺旋结构。此外，在二维NMR频谱上观察到表明存在三重螺旋结构的信号。将来，我们计划分配每个信号，并定量估计形成三重螺旋的程度。此外，该肽被固定在N末端的琼脂糖珠上，并验证了吸附变性LDL的能力。结果，已经揭示了变性的LDL非特异性地吸附到这些珠子上，因此很难测量固定肽的作用。将来，我们将考虑优化用于固定化和肽的载体之间的间隔者，并旨在将其用作净化材料。