圧負荷が血管壁の細胞を増殖させる機序と病態生理学的意義 -ヒト血管由来の細胞における検討-

压力超负荷引起血管壁细胞增殖的机制及病理生理学意义 - 人体血管来源细胞的研究 -

• 批准号: 09770526
• 负责人: 岡崎 昌博
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770526/
• 关键词: 圧負荷; 血管平滑筋; プロテインキナーゼ; 大動脈

一年目の結果では、圧負荷(transmural pressure)によってラット培養血管平滑筋細胞のDNA合成が有意に促進し、細胞数も増加するという結果が得られた。(%changes of controlにて120〜210%の増加)。time courseならびにpressure dependencyの結果から圧120mmHg、pressure loading time30分が本実験の至適条件と考えられた。このDNA合成はstretch-activated mechanosensitive channelsblockerであるGdCl_3(10μM)では抑制されず、protein kinase Cinhibitor(H7(3μM)andBisindolylmaleimide I(1μM))、tyrosine kinase inhibitor(Genistein(3μM))ならびにMAP kinasekinase(MEK)inhibitor(PD98059(25μM))で抑制された。またextracellular signal-regulated kinase(ERK)activityをenzyme assay法にて測走したところ、圧負荷2分にて約3.1倍と有意に活性の増加を認めている。Western BlottingによりERKのphospholyrationも1.6倍と増加していた。以上の結果より圧負荷によるラット培養血管平滑筋細胞の増殖にはprotein kinaseCやtyrosine kinase以外にextracellular signal-regulated kinase(MAPkinase)が強く関与していることが示唆された。

The results showed that DNA synthesis of cultured vascular smooth muscle cells was intentionally promoted under transmural pressure, and the number of cells was increased. (%changes of control increased by 120 ~ 210%). Time course: Pressure dependency: 120mmHg, pressure loading time: 30 min DNA synthesis was inhibited by GdCl3 (10μM), protein kinase inhibitor (H7(3μM) and Bisindolylmaleimide I(1μM)), tyrosine kinase inhibitor(Genistein(3 μ M)) and MAP kinase (MEK)inhibitor(PD98059(25μM)). Extracellular signal-regulated kinase(ERK)activity was measured by enzyme assay method, and the pressure load was 2 minutes, about 3.1 times, and the activity was increased intentionally. Western Blotting increased ERK phosphorylation by 1.6 times. The results showed that extracellular signal-regulated kinase(MAPkinase) was strongly related to the proliferation of vascular smooth muscle cells cultured under different stress conditions.