新たな増殖因子作動性カルシウムチャネルの探索とその活性制御機構の解析

寻找新的生长因子操纵的钙通道并分析其活性控制机制

• 批准号: 09770774
• 负责人: 神崎 展
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770774/
• 关键词: カルシウムチャネル; 増殖因子; クローニング; GTP結合蛋白

昨年度の検討により、マウス胸腺cDNAライブラリーから新規チャネル様蛋白の遺伝子の単離に成功し、その機能解析を遺伝子工学的、電気生理学的手法を用いて行った。この遺伝子は全長2268bpで、アミノ酸756残基からなり細胞膜を6回貫通する新規チャネル様蛋白をコードしていた。trp familyに属するカプサイシン受容体(VRl)と約43%の相同性が認められた。ノーザン解析により種々の組織でその発現が認められ、特に胸腺、肺、脳で強く発現していた。発現ベクターにcDNAを組み込みCHO細胞などに強制発現させたところ、インスリン様成長因子-1(IGF-I)に反応し細胞内カルシウム濃度が著明に増加した。C末端に対する抗体を作製し細胞内における局在、各組織におけるこの蛋白の発現についても検討した。IGF-I刺激によりこのチャネル蛋白の細胞内から細胞膜上へのトランスローケションが惹起されることが免疫染色により確認された。。電気生理学的検討から、IGF-Iで前処理した強制発現細胞では陽イオンの透過性が大きく増加しており、このチャネル蛋白がnon-selective Ca2+透過性チャネルとして機能することが確認された。結論:増殖因子作動性の新規カルシウム透過性チャネルを同定した。

In the past year, the research on thymic cDNA has been successfully carried out by means of gene engineering and electrophysiology. The gene is 2268bp in length and contains 756 residues. TRP family members belong to the VRl family and have approximately 43% identity. In the analysis of the tissue, the expression of all kinds of tissues is recognized, especially in the thymus, lung and lung. The expression of IGF-I in CHO cells was significantly higher than that in normal CHO cells. C-terminal antibodies are used to control the development of proteins in cells and tissues. IGF-I stimulates the expression of these proteins in the intracellular membrane, and the expression of these proteins in the cellular membrane is confirmed by immunostaining. Electrophysiological studies of IGF-I pretreatment and stress response cells confirm the increased permeability of non-selective Ca2 + permeability and function of non-selective Ca2 + permeability. Conclusion: The new regulation of the activation of reproductive factors is consistent with the regulation of the permeability of reproductive factors.

项目成果

Kanzaki,M.他: "Activation of the calcium-permeable cation channel CD20 by α-subunits of the Gi protein." J.Biol.Chem.272. 14733-14739 (1997)

Kanzaki, M. 等人：“Gi 蛋白 α 亚基激活钙渗透性阳离子通道 CD20。”J.Biol.Chem.272（1997）。

Nie,L.他: "Activation of calcium-permeable cation channel by insulin in chinese hamster ovary cells expressing human insulin receptors." Endocrinology.139. 179-188 (1998)

Nie, L. 等人：“表达人胰岛素受体的中国仓鼠卵巢细胞中胰岛素对钙渗透性阳离子通道的激活。”139-188 (1998)。

Ishiyama,N.他: "Studies on the betacellulin receptor in pancreatic AR42J cells." Diabetologia.41. 623-628 (1998)

Ishiyama, N. 等人：“胰腺 AR42J 细胞中 betacellulin 受体的研究。” 623-628 (1998)。

Nie,L.他: "Activation of calcium-permeable cation channel by insulin in chinese hamster ovary cells expressing human insulin receptors." Endocrinology. 139. 179-188 (1998)

Nie, L. 等人：“胰岛素在表达人胰岛素受体的中国仓鼠卵巢细胞中激活钙渗透性阳离子通道。” 内分泌学 139. 179-188 (1998)

神崎 展、他: "成長因子受容体" 生体の科学. 48巻5号. 489-494 (1997)

Nobu Kanzaki 等：“生长因子受体”，生物科学，第 48 卷，第 5 期，489-494（1997 年）。