歯周病原性細菌由来LPSが接合上皮における細胞間ギャップ結合に与える影響

牙周病原菌LPS对交界上皮细胞间隙连接的影响

• 批准号: 09771626
• 负责人: 池田 康男
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771626/
• 关键词: LPS; 接合上皮; 蛍光抗体法; 歯周炎

実験動物には6週令ルイス系雄性ラットを使用し、LPSには歯周病原性細菌であるActinobacillus actinomycetemcomitansより精製したLPSを使用した。実験方法はラット左側下顎臼歯部舌側の歯肉溝より防湿下にてLPSを30分間滴下した。これを連日繰り返し1,3,7,10,15日後、エーテル麻酔下にて屠殺後下顎骨を採取し、PLP固定液によって4℃で6時間固定後、EDTAで脱灰を行った。そしてそれぞれをAMeX包埋し、そのパラフィンブロックより連続切片を作製した。また一方でLPSをウサギに免疫し、その血清より抗LPS抗体を精製した。この精製抗体とFITC標識抗体を用いた蛍光抗体法による免疫染色とH・E染色から、滴下したLPSの歯周組織内の局在と接合上皮の組織学的変化を観察した。その結果3日滴下後で接合上皮内にFITC陽性細胞が確認され、7日滴下後では接合上皮内で根面にそってさらに根尖側方向にまで観察され、10、13日滴下後では深部結合組織内にも陽性細胞は確認された。H・Eによる組織所見と合わせて考えると、繰り返し滴下したLPSは接合上皮内の細胞間を進入し、その上皮細胞の変性を引き起こし、さらに深部の結合組織にまでLPSは進入し、結合組織の変性や壊死を起こしていることが推測された。

In the case of animals, the use of LPS is a challenge for the development of pathogenic bacteria. The method is to drip LPS 30 minutes into the lingual groove of the left mandibular socket under moisture protection. After 1,3,7,10,15 days, the mandible was taken after killing, PLP was fixed at 4℃ for 6 days, EDTA was deashed. The AMeX was embedded in the tissue, and the tissue was cut into pieces. The anti-LPS antibody was purified from the serum. The purified antibody and FITC labeled antibody were used for immunostaining and histological examination of LPS in peripheral tissues. FITC positive cells were identified in the conjunctive epithelium 3 days after instillation, in the root surface 7 days after instillation, and in the deep conjunctive tissue 10 and 13 days after instillation. H.E., LPS enters the intercellular space in the conjunctive epithelium, LPS enters the intercellular space in the conjunctive