DIDSによるアポトーシス抑制作用の分子機構の解明

阐明DIDS抑制细胞凋亡作用的分子机制

• 批准号: 09771970
• 负责人: 氷見 敏行
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771970/
• 关键词: DIDS; アポトーシス; 細胞死; ミトコンドリア; スナネズミ; 虚血; カスペース; 神経細胞; caspase; 小脳顆粒細胞; イトクロームC

当研究課題では、新規細胞死抑制物質DIDSについて、1)その細胞死抑制の分子機構を明らかにし,2)神経脱落を伴う疾患モデルに有効であるかを検討した。1) DIDSの細胞死抑制の作用点は,すでにcaspase活性化の前段階に存在することが示されていたので、特にミトコンドリアに対する影響に注目して検討した。細胞死誘導には以下の様々な刺激を用いた。高カリウム下、あるいは、インシュリン共存下培養し、通常の培養液に移行ミトコンドリア脱共役剤CCCPスタウロスポリン、過酸化水素、グルタミン酸による刺激細胞死の進行に伴って、ミトコンドリア膜電位の低下が観察された。DIDSの共存によって細胞死もミトコンドリア膜電位の低下も、ともに抑制された。しかしながら、ミトコンドリア膜電位の低下はcaspase活性化に先行しないこと、ならびに、CCCPによって誘導される細胞死では、ミトコンドリア膜電位が平衡化しても、数時間を経ないとcaspases活性化が観察されないこと、この間に細胞を培養液で洗うと、細胞死に至らないことなどから、ミトコンドリア膜電位の低下はこれらの刺激による細胞死の進行において寄与が小さいと結論づけた。さらに、CCCPによってミトコンドリア膜電位が平衡化した後であっても、DIDSは、細胞死を抑制した。したがって、DIDSはミトコンドリア膜電位の維持によって細胞死進行を抑制するのではなく、DIDSによって細胞死が抑制された結果、ミトコンドリア膜電位が維持されたのである。2) スナネズミを用いた一過性脳虚血モデルに対するDIDSの神経細胞保護効果を検討した。虚血負荷に先立って、DIDSの全身投与を行ったが、海馬CAl野の脱落には影響がみられなかった。DIDSの中枢移行性等の問題が考えられるので、DIDSの投与経路や虚血モデルについて、当研究課題終了後も引き続き検討を行っている。

When research topic で は, new rules on cell death inhibiting substance DIDS に つ い て, 1) そ の cell death inhibiting の molecular institutions を Ming ら か に し, 2) god shedding 経 を associated with う disorders モ デ ル に have sharper で あ る か を beg し 検 た. 1) DIDS の cell death inhibiting の point は, す で に caspase activation の exist in order に す る こ と が shown さ れ て い た の で, に ミ ト コ ン ド リ ア に す seaborne る に stable1126 し て beg し 検 た. Cell death induction に に the following <s:1> 々な stimulation を with に た. , under the high カ リ ウ ム あ る い は, イ ン シ ュ リ ン coexist under し, usually に の cultures of transitional ミ ト コ ン ド リ ア off altogether "tonic CCCP ス タ ウ ロ ス ポ リ ン, acidic water element, グ ル タ ミ ン acid に よ る stimulate cell death の に with っ て, ミ ト コ ン ド リ ア membrane potential low の が 観 examine さ れ た. DIDS <s:1> coexisting によって cell death トコ トコ ドリア ドリア low membrane potential <e:1> <s:1> と と に inhibitory された. し か し な が ら, ミ ト コ ン ド リ ア membrane potential low の は caspase activation に first し な い こ と, な ら び に, CCCP に よ っ て induced さ れ る cell death で は, ミ ト コ ン ド リ ア membrane potential が equilibration し て も, several time を 経 な い と caspases activation が 観 examine さ れ な い こ と, こ の を に between cells develop Liquid で wash う に と, cell death to ら な い こ と な ど か ら, ミ ト コ ン ド リ ア membrane potential low の は こ れ ら の stimulus に よ る cell death の に お い て send with が small さ い と conclusion づ け た. さ ら に, CCCP に よ っ て ミ ト コ ン ド リ ア membrane potential が equilibration し た after で あ っ て も, DIDS は, cells die を suppression し た. し た が っ て, DIDS は ミ ト コ ン ド リ ア membrane potential の maintain に よ っ て cell death を inhibit す る の で は な く, DIDS に よ っ て cell death が inhibit さ れ た results, ミ ト コ ン ド リ ア membrane potential が maintain さ れ た の で あ る. 2) ス ナ ネ ズ ミ を with い た transient 脳 virtual blood モ デ ル に す seaborne る DIDS の 経 cells protect the unseen god fruit を beg し 検 た. The load of deficient blood に first establishes って, DIDS <s:1> systemic injection and を flow ったが, hippocampal CAl field <s:1> shedding に がみられな affects がみられな がみられな った った. DIDS の の problem such as central transitional sex が exam え ら れ る の で, DIDS の cast with や 経 road holding blood モ デ ル に つ い て, when after the end of study も lead き 続 き 検 line for を っ て い る.

项目成果

Masayuki Ikeda: "Induction of Neuronal Nitric oxide Synthase by Methylmercury in the cerebellum" Journal of Neuroscience.Research. 55・3. 352-356 (1999)

Masayuki Ikeda：“小脑中甲基汞诱导神经元一氧化氮合成酶”《神经科学杂志》55・3（1999）。

Masayuki Ikeda: "Neuronal nitric oxide synthase is residenl"

池田雅之：“神经元一氧化氮合酶是常驻的”

Toshiyuki Himi: "A caspase inhibitor blocks ischemia-induced delayed neuronal death in the gerbil" European Journal of Neuroscience. 10・2. 777-781 (1998)

Toshiyuki Himi：“半胱天冬酶抑制剂可阻止沙鼠缺血引起的延迟性神经元死亡”《欧洲神经科学杂志》10・2（1998）。

Toshiyuki Himi: "A caspase inhibitor blocks ischemia-induced dilayed neuronal death in the gerbil." European Journal of Neurossienco. 10(2). 777-781 (1998)

Toshiyuki Himi：“一种半胱天冬酶抑制剂可以阻止沙鼠缺血引起的延迟性神经元死亡。”