細胞内小器官ペルオキシソームの形成および機能発現分子機構の解析

细胞内细胞器过氧化物酶体形成和功能表达的分子机制分析

• 批准号: 09780549
• 负责人: 田村 茂彦
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780549/
• 关键词: ペルオキシソーム; ペルオキシソーム欠損症; 患者解析; ペルオキソソーム形成因子; AAA蛋白質

ペルオキシソーム形成機構の全体像を明らかにするため、それに関わる因子の同定を目指して研究を行った。そこでまずペルオキシソーム欠損症の中でも最も患者数の多い相補性群として知られるE群の相補遺伝子として、PEX1をCHO細胞を用いてヒトcDNA発現ライブラリーから機能相補クローニング法に従って同定した。このcDNAは全長約4200bpから成り、そのコード領域は1283アミノ酸から成る蛋白質をコードしていた。PEX1の推定アミノ酸配列中には2カ所ずつのウォーカーモチーフAおよびB、そしてAAA蛋白質において高い相同性を持つ領域SRHを含んでおり、PEX1はAAA蛋白質ファミリーに属していることを示した。PEX1はE群(米国I群)に属するヒト患者由来の繊維芽細胞そしてペルオキシソーム欠損性CHO細胞における相補遺伝子であることを形態学的にだけでなく生化学的にも明らかにした。またE群の繊維芽細胞のひとつであるPBDE-04においては664番目のLeuがProにミスセンス変異したもの、そして634番目のGlyから69番目のHiSが欠失した変異が存在し、これらの変異がペルオキシソーム欠損症の原因となっていることを明らかにした。そしてE群に属する繊維芽細胞の中で、30℃でペルオキシソーム形成が回復するという温度感受性を示す細胞があることを岐阜大(医)のグループが見いだすと同時に、本課題研究の申請者らが843番目のGlyがAspへ変異することで温度感受性の原因となっていることを形態学的および生化学的に明らかにした。このPEX1温度感受性変異は患者の臨床症状において軽症型を与えるという非常に興味深いかつ重要な知見も見いだした。さらにPEX1遺伝子産物であるPex1pはPex6pと複合体を形成していることを見いだし、この複合体形成がペルオキシソームの形成におけるPex1pの機能に重要な役割を果たしていることを示唆した。

The whole picture of the formation mechanism is clear, and the relevant factors are studied. The number of patients with multiple complementary groups in CHO cells is the highest in the study. The cDNA is about 4200bp in length and 1283 bp in protein. PEX1 putative acid sequence is shown in the following table: A, B, C, A, B, A, B, C, A, D, C, D, D, C, D, E, D, E, E, F, F, PEX1 is a group E (group I) that belongs to patient-derived vascular germ cells. It is a morphological complement to defective CHO cells. It is a biochemical complement. PBDE-04 is the first time that the E group of cells has been damaged. It is the first time that the E group has been damaged. In addition, the applicant of this project studied the reasons for the differences in temperature sensitivity of the Gly 843 cells belonging to the E group and the morphological and biochemical aspects. This PEX1 temperature sensitivity varies according to the patient's clinical symptoms, symptoms and symptoms, and is very interesting and important. Pex1p is a protein product that forms a complex called Pex 6 p, and its function is important for the formation of a complex called Pex 6 p.

项目成果

Tamura,S.: "Human PEX1 cloned by functional complementation on a CHO cell mutant is responsible for peroxisome-deficient Zellweger syndrome of complementation group I" Proc.Natl.Acad.Sci.USA.95. 4350-4355 (1998)

Tamura,S.：“通过 CHO 细胞突变体的功能互补克隆的人 PEX1 是导致互补组 I 的过氧化物酶体缺陷 Zellweger 综合征的原因”Proc.Natl.Acad.Sci.USA.95。

Okumoto,K.: "Mutation in PEX10 is the cause of Zellweger peroxisome-deficiency syndrome of complementation group B" Hum.Mol.Genet.7. 1399-1405 (1998)

Okumoto,K.：“PEX10 突变是互补 B 组 Zellweger 过氧化物酶体缺乏综合征的原因”Hum.Mol.Genet.7。

Honsho,M.: "Mutation in PEX16 is causal in the peroxisome-deficient Zellweger syndrome of complementation group D" Am.J.Hum.Genet.63. 1622-1630 (1998)

Honsho,M.：“PEX16 突变是互补组 D 过氧化物酶体缺陷 Zellweger 综合征的原因”Am.J.Hum.Genet.63。

Okumoto,K.: "PEX12,the pathogenic gene of group III Zellweger syndrome: cDNA cloning by functional complementation on a CHO cell mutant,patient analysis,and characterization of Pex12p" Mol.Cell.Biol.18. 4324-4336 (1998)

Okumoto,K.：“PEX12，III 组 Zellweger 综合征的致病基因：通过 CHO 细胞突变体的功能互补进行 cDNA 克隆、患者分析和 Pex12p 的表征”Mol.Cell.Biol.18。

Matsuzono,Y.: "Human PEX19 : cDNA cloning by functional complementation, mutation analysis in a Zellweger patient, and potential role in peroxisomal membrane assembly."Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 96. 2116-2121 (1999)

Matsuzono,Y.：“人类 PEX19：通过功能互补进行 cDNA 克隆、Zellweger 患者的突变分析以及在过氧化物酶体膜组装中的潜在作用。”Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 96. 2116-2121 (1999)