脳虚血による神経細胞でのNFκBおよびc-junの活性化と低体温によるその抑制

脑缺血神经元NFκB和c-jun的激活及其低温抑制

• 批准号: 10770699
• 负责人: 飯田 隆昭
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Kanazawa Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770699/
• 关键词: NF-κB; 脳虚血; アポトーシス

一過性前脳虚血後のスナネズミ海馬CA1錐体細胞の遅発性神経細胞死におけるアポトーシス関連遺伝子群の発現誘導機構に関して,転写因子NF-κBの活性化に注目して検討し,以下の結果を得た.1.偽手術および虚血再灌流5,10,20,30,60,120分後の海馬CA1領域の核分画蛋白のFITC標識NF-κB結合配列DNAプローブ(FITC-5'-AGTTGAGGGGACTTTCCCAGGC-3')によるgel shift assay法により,一過性前脳虚血再灌流5分後から始まり,再灌流20〜30分後をピークにした泳動遅延バンドを観察した.2.偽手術および虚血再灌流5,10,20分後の海馬CAl領域の核分画蛋白の抗NF-κBp65抗体に対するWestem blot法により,NF-κBp65の核内移行は虚血再灌流5分後からみられ,虚血再灌流20分後まで亢進を認めた.3.非虚血および虚血再灌流30分後の海馬前額断凍結切片上で免疫組織化学を行い,NF-κBの核内移行を形態学的に観察した.偽手術では海馬CAl錐体細胞の細胞質にNF-κBp50を認めるのに対して,虚血再灌流後30分後ではNF-κBp50は核内に認めた.4.NF-κBと協力作用を有するHMG-1(Y)の発現が,一過性前脳虚血6-48時間後の海馬CAl錐体細胞に認めた.5.虚血中低体温(34℃)により遅発性神経細胞死・TUNEL法陽性所見は著名に減弱した.また,HMG-1(Y)の発現も減弱がみられた.以上の結果より,一過性前脳虚血灌流後早期のNF-κBの核内移行,活性化が確認され,アポトーシス誘導機構におけるNF-κBの関与が強く示唆され,さらに,HMG-1(Y)の関与も示唆された.

The mechanism of activation of NF-κB was investigated. 1. Sham operation and reperfusion 5, 10, 20, 30, 60. FITC labeling of nuclear protein in CA1 domain of hippocampus after 120 minutes NF-κB binding ligand DNA (FITC-5'-AGTTGAGGGGACTTTCCCAGGC-3') The gel shift assay was used to detect the transient pre-emptive reperfusion after 5 min, and the transient pre-emptive reperfusion after 20 ~ 30 min was used to detect the transient post-emptive reperfusion after 5 min, 10 min, 20 min, 20 min, 2 Western blot analysis showed that NF-κ Bp65 protein in hippocampus CA1 region after 20 min was transitioned to NF-κ Bp65 protein after 5 min reperfusion, and NF-κ Bp65 protein was transitioned to NF-κ Bp65 protein after 20 min reperfusion. 3. Immunohistochemical analysis showed NF-κB protein in hippocampus CA1 region after 30 min reperfusion. 4. The expression of HMG-1(Y) was detected after 30 min of ischemia reperfusion, and the expression of HMG-1(Y) was detected after 6-48 min of transient ischemia reperfusion. 5. The expression of NF-κ Bp50 in hippocampal CA1 pyramidal cells decreased significantly after ischemia reperfusion. HMG-1(Y) was found to be weak. The results showed that NF-κ B activity and migration in the early stage after transient hypoperfusion were confirmed, NF-κ B activation and activation were detected, and HMG-1(Y) activation and activation were detected.