ヒト組織の誘導性プロスタグランジンD_2ハ-ケト還元酵素アイソザイムの機能

诱导型前列腺素D_2白酮还原酶同工酶在人体组织中的作用

• 批准号: 10771297
• 负责人: 松浦 一也
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Gifu Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10771297/
• 关键词: 3α-ヒドロキシステロイド脱水素酵素; 酵素多型; プロスタグランジンD_2還元酵素; ゲラニルゲラニオール; ファルネソール; アポトーシス

1. ヒト肝の3種の3α-ヒドロキシステロイド脱水素酵素(3α-HSD)アイソザイムと約80%の相同性を示し、ヒト骨髄性白血病前駆細胞から単離されたcDNAにコードされる新規酵素(DBDH)を大腸菌内で発現、精製した。DBDHは弱い3α(17β)-HSD活性を示した他、従来のプロスタグランジン(PG)D_2還元酵素と比べて、非常に強い9α,11β-PGF_2/PGD_2の酸化還元活性を示した。また、DBDHは、非ステロイド性抗炎症剤により、他の3α-HSDアイソザイムよりも強力に阻害された。また、DBDH mRNAは肝、腎、肺を含むヒトの11種の組織に検出された。2. DBDHとヒト肝の3種の3α-HSDアイソザイムのイソプレニルアルコール類に対する触媒特性を検討した結果、DBDHのみがファルネソールやゲラニルゲラニオールに対し、9α,11β-PGF_2に匹敵する高い酸化活性を示した。3. ヒト組織(腎の正常部とガン部2例ずつ、正常肝2例)およびヒト腫瘍細胞における本酵素の発現をDBDHに特異的な基質を用いた酵素活性分析により検討したが、これらの組織ではDBDHの発現量は非常に低かった。しかし、DBDH抗体を用いたイムノブロット分析の結果、HepG2細胞ではDBDHが他のアイソザイムよりも多く発現している可能性が示唆された。4. エタクリン酸(50μM)で処理したHepG2細胞ではDBDH mRNAの誘導と共に、ファルネソール脱水素酵素活性が約1.2倍に増大した。いくつかの腫瘍細胞ではゲラニルゲラニオールおよびその酸化体ゲラニルゲラノイン酸によってアポトーシスが誘導されるので、DBDHはこれらのイソプレニルアルコール類の酸化代謝を促進し、アポトーシスの誘導やその阻止に関わっている可能性がある。

1. Three kinds of 3α-HSD enzymes have approximately 80% identity. The cDNA of DBDH is isolated from leukemia cells and purified in Escherichia coli. DBDH showed weak 3α(17β)-HSD activity and strong 9α, 11 β-PGF2/PGD2 activity. DBDH is a potent anti-inflammatory agent and its 3α-HSD anti-inflammatory agent. DBDH mRNA was expressed in 11 tissues including liver, kidney and lung. 2. The catalytic properties of DBDH and its three kinds of 3α-HSD were investigated. The catalytic properties of DBDH and its three kinds of 3 α-HSD were compared with those of 9α, 11 β-PGF_2. 3. The expression of DBDH in tissues (normal kidney 2 cases, normal liver 2 cases) was detected by enzyme activity analysis in tissue samples. The results of the DBDH antibody assay indicate the possibility of DBDH antibody detection in HepG2 cells. 4. When HepG2 cells were treated with 50μM of doxycycline, DBDH mRNA was induced and the activity of DNA-D In addition, DBDH has the possibility of promoting and preventing the acidification metabolism of tumor cells.

项目成果

Matsuura.K.,et al: "Identification of a principal mRNA species for human 3α-hydroxysteroid dehydrogenase isoform(AKRIC3)that exhibits high prostaglandin D_2 II-Ketoreductase activity^1" Journal of Biochemistry. 124(発表予定). (1998)

Matsuura.K. 等人：“具有高前列腺素 D_2 II-酮还原酶活性^1 的人 3α-羟基类固醇脱氢酶异构体 (AKRIC3) 的主要 mRNA 种类的鉴定”《生物化学杂志》124（待出版）。 ）