受容体チロシンキナーゼEGFレセプターの糖鎖構造のリモデリングによる増殖制御

通过受体酪氨酸激酶EGF受体碳水化合物结构重塑来控制增殖

• 批准号: 11770062
• 负责人: 高橋 素子
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770062/
• 关键词: 糖転移酵素; GnT-III; シグナル伝達; 増殖因子; EGFレセプター; エンドサイトーシス

本研究ではHeLaS3細胞にGnT-III遺伝子を導入することによって、EGFシグナル経路にどのような変化が起こるかを検討した。^<125>I-EGFを用いた実験によってGnT-III導入細胞ではEGFレセプターのEGF結合能が低下していることが明らかとなったが、スキャッチャード解析により、これは主に低親和性受容体の減少によるものであることがわかった。高親和性受容体には変化がみられず、EGFレセプターの自己リン酸化の程度には変化がないことがわかった。一方、GnT-III導入細胞では受容体のエンドサイトーシスが亢進し、ERKの活性化が上昇することが明らかとなった。受容体のエンドサイトーシスの変化の機序を検討したところ、GnT-III導入細胞ではエンドサイトーシスに関与すると考えられているEGFレセプターのCaInドメイン中の^<996>Q-^<1022>Tに修飾がおこっていることが示唆された。この^<996>Q-^<1022>Tという配列はEGFレセプターの細胞内ドメインに存在するため、糖鎖に直接関係した修飾ではないと考えられる。現在精製EGFレセプターのペプチドマッピングをおこなうことにより、その修飾の位置と種類の同定を行っている。今後、この修飾がEGFシグナル経路にどのように影響するかをさらに検討する予定である。

This study focused on the introduction of GnT-III into HeLaS3 cells.よって、EGFシグナル経路にどのような変化が开こるかを検検柗た. ^<125>I-EGF was introduced into the cells using GnT-III and the EGF binding ability was low.ことが明らかとなったが、スキャッチャードanalyticsにより、これIt is mainly used to reduce low-affinity receptors. The high-affinity receptors are high-affinity receptors and the EGF receptors are high-affinity acidified. On the one hand, GnT-III is introduced into the cell to activate the receptor and activate ERK. G nT-III is introduced into cells.られているEGFレセプターのCaInドメイン中の^<996 >Q-^<1022>Tに MODIFICATION がおこっていることがshows instigation された.この^<996>Q-^<1022>T という配arrayはEGFレセプターのcell There is a direct relationship between the existence of inner ドメインに and the sugar lock したmodification ではないと卡えられる. Now we have refined EGF レセプターのペプチドマッピングをおこなうことにより, そのmodificationのpositionとkindの同定を行っている. From now on, it will be determined that the EGF will be modified by the new EGF and the impact will be affected by the change.

项目成果

Wu X.,Takahashi M.,Che CG.,Monnier VM.: "Cloning of amadoriase I isozyme from Aspergillus sp: Evidence of FAD covalently linked to Cys342"Biochemistry. 39. 1515-1521 (2000)

Wu X.，Takahashi M.，Che CG.，Monnier VM.：“从曲霉属中克隆阿马多里酶 I 同工酶：FAD 与 Cys342 共价连接的证据”生物化学。

Kon YH. et al.: "Aldehyde reductase gene expression by lipid peroxidation end products, MDA and HNE."Free Rad.Res.. (2001)

康玉华.

Hamaoka R.Et al.: "Overexpression of the aldose reducatse gene induces apoptosis in pancreatic β-cells by causing a recox imbalance"Journal of Biochemistry. 126. 41-47 (1999)

Hamaoka R.Et al.：“醛糖还原酶基因的过度表达通过引起 recox 失衡诱导胰腺 β 细胞凋亡”《生物化学杂志》126. 41-47 (1999)。

Wu X.,Takahashi M., et al.: "Cloning of amadoriase I isozyme from Aspergillus sp : Evidence of FAD covalently linked to Cys342."Biochemistry. 39. 1515-1521 (2000)

Wu X.，Takahashi M.，等人：“从曲霉属中克隆阿马多里酶 I 同工酶：FAD 与 Cys342 共价连接的证据。”生物化学。

Sato Y.,Takahashi M., et al.: "Overexpression of N-Acetylglucosaminy Itransferase III enhances the EGF-induced phophorylation of ERK in HeLaS3 cels by upregulation of the internalization rate of the receptors."J.Biol.Chem.. (2001)

Sato Y.、Takahashi M. 等人：“N-乙酰葡糖胺转移酶 III 的过度表达通过上调受体的内化率增强 HeLaS3 细胞中 EGF 诱导的 ERK 磷酸化。”J.Biol.Chem..（