冠攣縮の病因解明:変異型eNOS遺伝子(-786C)の転写を抑制するRPAの意義
冠攣縮の病因解明:変異型eNOS遺伝子(-786C)の転写を抑制するRPAの意義
阐明冠状动脉痉挛的发病机制：抑制突变型 eNOS 基因（-786C）转录的 RPA 的意义
批准号：
11770389
负责人：
宮本 恵宏
金额：
$1.34万
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1999 至 2000
中文摘要
翻译
1.eNOS遺伝子の-786C変異とRPA1の発現がeNOS遺伝子発現に及ぼす影響の検討RPA1(replication protein A1)はこれまで遺伝子の修復に関与する核蛋白質であると考えられていた。ウエスタン・ブロット法で検討したところ、臍帯静脈、大動脈、冠動脈それぞれ由来のヒト血管内皮細胞にてRPA1の蛋白発現が確認され、内皮型一酸化窒素合成酵素遺伝子(eNOS)遺伝子の野生型及び変異型プロモーターを繋いだルシフェレースレポーター遺伝子をトランスフェクションし、転写活性を比較したところ野生型プロモーターに比べ変異型プロモーターはその転写活性は約20%の低下を認めた。2.生体組織におけるRPA1の発現と-786C変異がeNOS遺伝子発現に及ぼす影響の検討ヒトの生体組織においてRPA1が血管組織に発現し、-786C変異がeNOS遺伝子の遺伝子発現に影響を与えているかを、血管組織が豊富なヒト胎盤組織を用いて検討した。ウエスタン・ブロット法にて胎盤組織にRPA1が存在することが確認され、遺伝子型を確定した胎盤組織において-786変異を有する胎盤組織では、野生型ホモに比べeNOS遺伝子の発現が減少していることがRNase protection法にて確認された。また、eNOS蛋白質の産生物質であるNOの血清レベルをNOxを測定することで検討したところ-786変異を有するヒトは野生型ホモに比べ、そのNOxレベルが有意に低値であり、-786変異を有するヒトにeNOS蛋白の量的あるいは機能的低下が存在することが予想された。現在さらに、eNOS遺伝子の-786変異と動脈硬化性疾患及び、糖尿病やその血管合併症の成因との関連を検討している。
英文摘要
1.eNOS遺伝子の-786C変異とRPA1の発現がeNOS遺伝子発現に及ぼす影響の検討RPA1(replication protein A1)はこれまで遺伝子の修復に関与する核蛋白質であると考えられていた。ウエスタン・ブロット法で検討したところ、臍帯静脈、大動脈、冠動脈それぞれ由来のヒト血管内皮細胞にてRPA1の蛋白発現が確認され、内皮型一酸化窒素合成酵素遺伝子(eNOS)遺伝子の野生型及び変異型プロモーターを繋いだルシフェレースレポーター遺伝子をトランスフェクションし、転写活性を比較したところ野生型プロモーターに比べ変異型プロモーターはその転写活性は約20%の低下を認めた。2.生体組織におけるRPA1の発現と-786C変異がeNOS遺伝子発現に及ぼす影響の検討ヒトの生体組織においてRPA1が血管組織に発現し、-786C変異がeNOS遺伝子の遺伝子発現に影響を与えているかを、血管組織が豊富なヒト胎盤組織を用いて検討した。ウエスタン・ブロット法にて胎盤組織にRPA1が存在することが確認され、遺伝子型を確定した胎盤組織において-786変異を有する胎盤組織では、野生型ホモに比べeNOS遺伝子の発現が減少していることがRNase protection法にて確認された。また、eNOS蛋白質の産生物質であるNOの血清レベルをNOxを測定することで検討したところ-786変異を有するヒトは野生型ホモに比べ、そのNOxレベルが有意に低値であり、-786変異を有するヒトにeNOS蛋白の量的あるいは機能的低下が存在することが予想された。現在さらに、eNOS遺伝子の-786変異と動脈硬化性疾患及び、糖尿病やその血管合併症の成因との関連を検討している。
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M.Yoshimura, et al.: "Genetic risk factors for coronary artery spasm : significance of endothelial nitric oxide synthase gene T-786→C and missense Glu298Asp variants"J Invest Med. 48・5. 367-374 (2000)
M. Yoshimura等人：“冠状动脉痉挛的遗传危险因素：内皮一氧化氮合酶基因T-786→C和错义Glu298Asp变体的意义”J Invest Med 48・5（2000）。
M. Yoshimura等人：“冠状动脉痉挛的遗传危险因素：内皮一氧化氮合酶基因T-786→C和错义Glu298Asp变体的意义”J Invest Med 48・5（2000）。
DOI：
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发表时间：
期刊：
影响因子：
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作者：
[]
通讯作者：
K.Kuwahara: "Involvement of cardiotrophin-1 in cardiac myocyte-nonmyocyte interactions during hypertrophy of rat cardiac myocytes in vitro"Circulation. 100・10. 1116-1124 (1999)
K.桑原：“体外大鼠心肌细胞肥大过程中心肌细胞与非心肌细胞相互作用的参与”循环100・10。
K.桑原：“体外大鼠心肌细胞肥大过程中心肌细胞与非心肌细胞相互作用的参与”循环100・10。
DOI：
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发表时间：
期刊：
影响因子：
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作者：
[]
通讯作者：
N.Kajiyama, et al.: "Lack of Association Between T^<-786>→ C Mutation in the 5'-Flanking region of the Endothelial Nitric Oxide Synthase Gene and Essential Hypertension."Hypertens.Res.. 23・6. 561-565 (2000)
N. Kajiyama 等人：“内皮一氧化氮合酶基因 5-侧翼区 T^<-786>→ C 突变与原发性高血压之间缺乏关联。”Hypertens.Res.. 23・6。 561-565 (2000)
N. Kajiyama 等人：“内皮一氧化氮合酶基因 5-侧翼区 T^<-786>→ C 突变与原发性高血压之间缺乏关联。”Hypertens.Res.. 23・6。 561-565 (2000)
DOI：
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发表时间：
期刊：
影响因子：
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作者：
[]
通讯作者：
M.Nakayama: "T-786 C mutation in the endothelial nitric oxide synthase gene is associated with coronary spasm : reduction in promoter activity"Circulation. 99・22. 2864-2870 (1999)
M.Nakayama：“内皮一氧化氮合酶基因中的 T-786 C 突变与冠状动脉痉挛相关：启动子活性降低”循环 99·22。
M.Nakayama：“内皮一氧化氮合酶基因中的 T-786 C 突变与冠状动脉痉挛相关：启动子活性降低”循环 99·22。
DOI：
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发表时间：
期刊：
影响因子：
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作者：
[]
通讯作者：
M. Ishikawa: "Heart-specific increase in cardiotrophin-1 gene Expression precedes establishment of ventricular hypertension in genetically hypertensive rats"J.Hypertens.. 17・6. 807-816 (1999)
M. Ishikawa：“遗传性高血压大鼠中心肌营养素 1 基因表达的心脏特异性增加先于心室高血压”J.Hypertens.. 17・6 (1999)。
M. Ishikawa：“遗传性高血压大鼠中心肌营养素 1 基因表达的心脏特异性增加先于心室高血压”J.Hypertens.. 17・6 (1999)。
DOI：
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发表时间：
期刊：
影响因子：
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作者：
[]
通讯作者：
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