内皮型一酸化窒素合成酵素に着目した下痢関連溶血性尿毒症症候群の病態解明研究

以内皮一氧化氮合酶为重点阐明腹泻相关溶血性尿毒症综合征发病机制的研究

• 批准号: 21K07842
• 负责人: 忍頂寺 毅史
• 金额: $ 2.25万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07842/
• 关键词: 溶血性尿毒症症候群; 内皮型一酸化窒素合成酵素

下痢関連溶血性尿毒症症候群(D+HUS)は小児で好発する重篤な疾患の一つで、腸管出血性大腸菌(EHEC)感染後、腎糸球体血管内皮細胞にて血栓性微小血管障害(TMA)を起こし腎機能障害に至る。分子レベルでの病態は未だ明らかでなく、かつ根本治療も存在しない。今回の研究ではその病態への内皮型一酸化窒素合成酵素(eNOS)の関与に注目しその病態解明を目指し、未だ存在しない治療法を開発する目的とする。eNOSは内皮細胞にのみ存在し、一酸化窒素(NO)を産生することでTMA抑制作用および抗炎症作用を持つことが明らかとなっているが、D+HUSヘの関与は未だ一切検討されていない。そこで本研究の具体的予定は１）腎糸球体血管内皮培養細胞にEHEC由来の志賀毒素(stx)を投与しeNOS活性化およびNO産生を確認評価。２）患者急性期の血球を用いたsingle cell RNAsequence、患者血清を用いたMass spectrometryによるD+HUS患者における特徴的RNA、蛋白のプロファイリングeNOS/NO関連分子の同定。３）eNOS/NOに対する阻害薬・促進薬を投与し２）で明らかにした分子の発現量の変化をin vitroで評価。４）分子生物学的手法で３）で病態に関与すると考えられた分子の発現を抑制した培養細胞を作成しstxを投与することで、TMA抑制・抗炎症効果等病態への関与を評価する。である。現在のところ実験系の確立を行っている段階であり実績を出すに至っていない。

与腹泻相关的溶血性尿毒症综合征（D+HUS）是儿童常见的严重疾病之一。在感染肠血管大肠杆菌（EHEC）后，血栓性微血管疾病（TMA）发生在肾小球血管内皮细胞中，导致肾功能障碍。分子水平的病理尚不清楚，并且没有基本治疗。这项研究的重点是内皮一氧化氮合酶（ENOS）参与病理学，旨在澄清病理，并开发出一种尚不存在的治疗方法。 eNOS仅存在于内皮细胞中，并且已经表明，它通过产生一氧化氮（NO）具有TMA抑制和抗炎特性，但是尚未研究D+HUS在D+HUS中的参与。因此，这项研究的具体计划是1）EHEC衍生的志贺毒素（STX）用于培养的肾小球血管内皮细胞，以确认和评估ENOS激活，而无产生。 2）使用急性血细胞在急性患者中使用急性血细胞和使用患者血清的质谱法对D+HUS患者的特征RNA和蛋白质进行分析。鉴定eNOS/无相关分子。 3）在体外评估了eNOS/NO的抑制剂和启动子的抑制剂和启动子，以及在2）中揭示的分子表达水平的变化。 4）使用分子生物学方法，培养的细胞抑制了被认为与病理学有关的分子表达的3）产生并施用STX，并评估了病理学的参与，例如TMA抑制和抗炎作用。这是。目前，我们目前正在建立实验系统，尚未取得任何结果。