权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

高IgE症候群の病態の解析のための高頻度にクラススイッチする細胞株の樹立

建立频繁转换类别的细胞系以分析高 IgE 综合征的病理学

基本信息

批准号：
11770458
负责人：
中村元信
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770458/
关键词：
クラススイッチ免疫グロブリン IgM IgA インターロイキン4 TGFβ CD40リガンド

项目摘要

インターロイキン4、TGFβ刺激により、免疫グロブリンのクラススイッチをひきおこすCH12.LX細胞から高頻度にクラススイッチする細胞株をクローニングするため、限界希釈法を2回試み、さらに数十%高頻度にIgMからIgAにクラススイッチする細胞株を樹立した。この細胞株をインターロイキン4、CD40リガンド、TGFβのさまざまな組み合わせで刺激し、それらのクラススイッチ誘導の経時的変化の観察をするため以下の実験を行った。1)限界希釈法によるB細胞株のクローニング2)FACSによるインターロイキン4刺激後の免疫グロブリンIgM,IgE,IgG,IgAの発現の解析3)FACSによるCD40リガンド、TGFβ、インターロイキン4同時刺激によるクラススイッチ誘導の度合いの検討4)FACSによる各サイトカインによるクラススイッチ誘導の経時的変化の観察今回、われわれはCD40リガンド、TGFβ、インターロイキン4を同時に72時間刺激することによって、50%近くも高頻度にIgMからIgAにクラススイッチする細胞株CH12F3細胞株を樹立した。CD40リガンド、TGFβ、インターロイキン4刺激はクラススイッチに相乗的な作用を示した。またこのクラススイッチの刺激はほぼ72時間でプラトーに達することが判明した。このような培養細胞系で高頻度にクラススイッチする細胞株を樹立することは、クラススイッチの免疫学的、生化学的な研究を容易にすることができ、その細胞株の解析を行うことにより、クラススイッチの機構をより明確にすることができ、クラススイッチに異常を持つ高IgE症候群の病態解明に大きな意義があると思う。

CH12. LX cell line with high frequency of IgM and IgA was established in 2 rounds of test by the method of limiting cell proliferation. The cell lines were stimulated and stimulated by CD4, CD40, TGFβ, and the following conditions were observed. 1)2) Analysis of the development of IgM,IgE,IgG,IgA in B cell lines after FACS stimulation 3) Analysis of the development of CD40, TGFβ, IgG in B cell lines induced by FACS simultaneous stimulation 4) Detection of the development of IgM, IgE, IgG, IgA in B cell lines induced by FACS CH12F3 cell line was established at a high frequency of IgM at 72 hours. CD40, TGFβ, and CD40 stimulate the growth and development of human beings. It was the first time that I had ever seen a woman. The establishment of cell lines with high frequency and the analysis of cell lines with high frequency and high specificity are of great significance in the diagnosis of high IgE syndrome.