アクチビンのヒト表皮角化細胞の増殖,分化に対する影響
激活素对人表皮角质形成细胞增殖和分化的影响
基本信息
- 批准号:11770465
- 负责人:
- 金额:$ 1.34万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1999
- 资助国家:日本
- 起止时间:1999 至 2000
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
平成12年度;表皮角化細胞の三次元培養系を用いたアクチビン、フォリスタチンの影響とSmadの発現。1)形態学的観察:皮膚の角化モデルとしての三次元培養系:ヒト表皮角化細胞はMCDB153培地を用いた無血清培養法で培養しているが、10%牛胎仔血清添加DME培地に変更して重層化し、角化層の形成を誘導できる。この重層化過程の培養液に200ng/mlのアクチビンとフォリスタチンを添加し、12時間ごとにホルマリン固定および標本を作製し、角化細胞の分化過程に対する影響をヘマトキシリン-エオジン染色標本にて観察したが、重層化過程の表皮角化細胞の形態に顕著な変化はなかった。しかし、フォリスタチン刺激時のヒト表皮角化細胞の分化のマーカーmRNAの変動を検討したところ、フォリスタチン刺激においてトランスグルタミナーゼ1とケラチン1、10の誘導が、無刺激の状態と比較すると若干早期から確認できた。すなわち、形態異常は伴わないが、早期に分化誘導を来す可能性が示唆された。ドミナントネガティブ・アクチビンレセブターをトランスフェクションした系においても重層化過程における形態的な変化は顕著ではなかった。2)Smad familyの発現の免疫組織学的検討:免疫染色法を用いて、重層化過程の表皮角化細胞にアクチビンを添加した時のSmad6,7の発現を組織学的に検討したが、有意な発現は確認できなかった。重層化状態においてはアクチビンの効果が少ないものと思われた。
In Heisei 12; The <s:1> three-dimensional culture line of epidermal keratinocytes を affects the occurrence of とSmad <e:1> by を たア <s:1> チビ チビ <e:1> フォリスタチ フォリスタチ. 観 examine: 1) the morphology is の skin keratinization モ デ ル と し て の three dimensional culture system: ヒ ト epidermal keratinocytes は MCDB153 petty を with い た serum-free culture method で し て い る が, 10% bovine fetal serum add DME petty に - more し て stratification し, keratin layer の form を induced で き る. に こ の heavy layer process の cultures of 200 ng/ml の ア ク チ ビ ン と フ ォ リ ス タ チ ン を add し, 12 time ご と に ホ ル マ リ ン fixed お よ び し the specimen を cropping, keratinocytes の differentiation に す seaborne る influence を ヘ マ ト キ シ リ ン - エ オ ジ ン stained specimens に て 観 examine し た が, heavy layer process の epidermal keratinocytes の form に 顕 Youdaoplaceholder0 variation な な った. し か し, フ ォ リ ス タ チ ン stimulation の ヒ ト epidermal keratinocytes の differentiation の マ ー カ ー mRNA の - move を beg し 検 た と こ ろ, フ ォ リ ス タ チ ン stimulus に お い て ト ラ ン ス グ ル タ ミ ナ ー ゼ 1 と ケ ラ チ ン 1, 10 の induced が, no stimulation の と compare す る と several early か ら confirm で き た. Youdaoplaceholder0, morphological abnormalities わな accompanied by わな が が, early に differentiation induces を to す possibility が suggests された. ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ ィ ブ · ア ク チ ビ ン レ セ ブ タ ー を ト ラ ン ス フ ェ ク シ ョ ン し た department に お い て も heavy layer process に お け な る form - the は 顕 the で は な か っ た. 2) the Smad family の 発 の now beg: immune histology 検 immune staining を with い て, heavy layer process の epidermal keratinocytes に ア ク チ ビ ン を add し た when の Smad6, 7 の 発 presently を histological に beg し 検 た が, intentionally な 発 は now confirm で き な か っ た. The layered state にお にお て ア ア <s:1> チビ <s:1> <s:1> results が less な <s:1> と と と thought われた.
项目成果
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