神経切断に対するTGF-β1を導入した培養Schwann細胞移植による神経再生

Schwann細胞の分離を行いslectroporationによってTGF-β1遺伝子をSchwann細胞への導入する実験を行ったが、現在なお、Schwann細胞へのTGF-β1遺伝子導入効率が低く、また、Schwann細胞の細胞生存率が低いままである。これを改善するために、TGF-β1遺伝子の導入する至適条件を求めるためにその細胞への刺激時間、刺激電圧、細胞濃度、細胞浮遊成分を変化させて、実験を行っている。この決定にはなお時間が必要であり、鋭意検索中である。。一方でSchwann細胞のコラーゲンゲル包埋材料を作製し、神経切断後の移植モデルを作製中で神経伝導速度の検索や末梢神経断端部やチューブ内におけるIL-1、TGF-β1などの各種サイトカインやlamininの発現を免疫組織学的に検索する方法はすでに確立できた。また、末梢神経線維や神経細胞体レベルでの細胞骨格(tubulin, neurofilament)や神経ペプタイド(substance-P, calcitonin-gene-related peptide, vasoactive-intesitinal peptide)などの発現を明らかにする免疫組織学的手法についても確立できた。従って、Schwann細胞へのTGF-β1遺伝子の導入効率が高く、しかも細胞生存率の高い至適条件が確立でき次第、TGF-β遺伝子導入Schwann細胞を神経断端間に移植し、その効果を評価する実験を行って結果を報告する予定である。

Schwann細胞の分離を行いslectroporationによってTGF-β1遺伝子をSchwann細胞への導入する実験を行ったが、現在なお、Schwann細胞へのTGF-β1遺伝子導入効率が低く、また、Schwann細胞の細胞生存率が低いままである。これを改善するために、TGF-β1遺伝子の導入する至適条件を求めるためにその細胞への刺激時間、刺激電圧、細胞濃度、細胞浮遊成分を変化させて、実験を行っている。この決定にはなお時間が必要であり、鋭意検索中である。。一方でSchwann細胞のコラーゲンゲル包埋材料を作製し、神経切断後の移植モデルを作製中で神経伝導速度の検索や末梢神経断端部やチューブ内におけるIL-1、TGF-β1などの各種サイトカインやlamininの発現を免疫組織学的に検索する方法はすでに確立できた。また、末梢神経線維や神経細胞体レベルでの細胞骨格(tubulin, neurofilament)や神経ペプタイド(substance-P, calcitonin-gene-related peptide, vasoactive-intesitinal peptide)などの発現を明らかにする免疫組織学的手法についても確立できた。従って、Schwann細胞へのTGF-β1遺伝子の導入効率が高く、しかも細胞生存率の高い至適条件が確立でき次第、TGF-β遺伝子導入Schwann細胞を神経断端間に移植し、その効果を評価する実験を行って結果を報告する予定である。