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エストリオールの骨芽細胞に対する直接作用に関する分子生物学的解析

雌三醇对成骨细胞直接影响的分子生物学分析

基本信息

批准号：
11770938
负责人：
吉田茂樹
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

エストロゲン、特にエストリオールの骨芽細胞に対する直接作用の詳細については明らかではない。前年度の研究により、エストラジオール(E2)ならびにエストリオール(E3)が、骨芽肉腫細胞株(HOS)の細胞増殖能を増加させ、細胞内IGF-I蛋白レベルを増加させ、さらにHOS細胞IGF-I mRNAレベルを増加させることを認めた。そこで本年度はさらにE2ならびにE3がHOS細胞IGF-I レセプター(IGF-I R)の発現に与える影響についてIGF-I Rに対するプライマーを用いた定量的RT-PCR法を用いて、mRNAレベルで検討を行った。その結果、HOS細胞にIGF-I RmRNAの発現を認めたが、その発現レベルに差を認めないことが確認された。このことから、E2ならびにE3がHOS細胞増殖能を促進する経路として、IGF-IならびにIGF-I Rを介して発現する可能性が示唆され、E2ならびにE3の骨芽細胞に対する直接作用の機序解明につながるものと考えられた。さらに、前年度E2ならびにE3がVitamin D3(Vit D3)との同時添加によりHOS細胞増殖能を相乗的に増加させたことから、本年度はE2ならびにE3とVit D3の同時添加がHOS細胞Vit Dレセプター(Vit DR)発現に与える影響について検討を行った。HOS細胞の無血清培地培養系にE2、E3とVit D3の同時添加を行い、添加48、72時間後におけるHOS細胞Vit DR mRNAの発現を、定量的BT-PCR法を用いて検討した。その結果、HOS細胞にVit DR mRNAが発現しており、添加48時間後では、E2、E3、Vit D3単独添加群に比較し同時添加群においてはHOS細胞のVit DR mRNAの発現がコントロール群に比較し増加することを認めた。さらに添加72時間後ではE2とVit D3同時添加群では認められなかったVit D RmRNA発現の増加が、E3とVit D3の同時添加群のみで観察された。E2ならびにE3とvit D3製剤の併用が骨粗鬆症の骨量増加に臨床上有効であることを認めているが、以上のin vitroにおける成績は、その作用機序解明における基礎的な裏付けとなるものと考えられる。

エストロゲン, 特にエストリオールのbone bud cell に対するDirect actionのDetails については明らかではない. The previous year's research was conducted on により, エストラジオール(E2)ならびにエストリオール(E3)が, and osteoblastoma cell line ( HOS) cell proliferation ability, intracellular IGF-I protein, HOS cell IGF-I MRNAレベルをaddさせることをcognizeめた.そこでThis year's はさらにE2ならびにE3がHOS cell IGF-I レセプター(IGF-I R)の発appears and える affects についてIGF-I Rに対するプライマーを用いたquantitative RT-PCR methodを用いて,mRNAレベルで検検行った.その results, HOS cells にIGF-I RmRNA の発appears to recognize めたが, その発appears レベルにdifferent をcognizes めないことがconfirm された.このことから、E2ならびにE3がHOS cell proliferation can be promoted する経路として、IGF-IならびにIGF-I The possibility of R's development and the direct action of E2's bone bud cells and E3's bone bud cells have been explained.さらに、Previous year E2ならびにE3がVitamin D3(Vit D3) When adding HOS cells at the same time, the proliferative capacity of HOS cells is multiplied by adding HOS cells at the same time. Dレセプター(Vit DR)発appears and える affects について検椒行った. The serum-free culture system of HOS cells was added with E2, E3 and Vit D3 at the same time, and the Vit DR mRNA of HOS cells was detected after 48 and 72 hours of addition, and the quantitative BT-PCR method was used.その results, HOS cells にVit DR mRNA が発appears しており, added 48 hours later では, E2, E3, Vit D3 alone added group に comparison し added group simultaneously においてはHOS cells DR mRNAの発appearsがコントロール群にComparisonしincreaseAddすることをidentificationめた.さらにAdd 72 hours laterではE2とVit D3 and add the group at the same timeでは recognizedめられなかったVit D RmRNA発appearのincrease+が、E3とVit D3 also adds group members. E2ならびにE3とvit D3 is clinically effective in increasing bone mass in patients with osteoporosis when used in combination. Test results of vitro test, test of the function of test machine and explanation of test results of test test of test of test and test of basic test.