脳梗塞の病態進行における卵巣ホルモン－細胞免疫相互作用の役割

本研究では、発症後の脳梗塞の病態進行に、卵巣ホルモン及び細胞性免疫がどのように関与するか、またホルモン療法が脳梗塞の予後を左右するかを明らかにすることを目的としている。2022年度は、卵巣摘出を施した雌マウスに光血栓性脳梗塞モデルを作製し、その後7日目までエストラジオール（E2）又は溶媒を投与することで、雌マウスにおけるエストラジオールの効果を検討した。その結果、E2投与マウスではミクログリアの活性化が抑制された一方、アストロサイトの反応性が上昇していることが分かった。我々はこれまでに、光血栓性脳梗塞モデルにおいては、ミクログリアの活性とアストロサイトの反応性が逆相関することを見出しており（Kondo et al., 2022）、本結果も同様の結果を示していた。一方、光血栓性脳梗塞モデルを作製した雄マウスにE2を投与し、7日後の脳梗塞部位の状態を観察したところ、卵巣摘出雌マウスほどE2の顕著な効果は認められなかった。このことからE2の効果は卵巣ホルモン以外の性差因子により影響を受けることが分かった。卵巣摘出雌マウスの脳梗塞部位から抽出したRNAを試料としてRT-PCR法を用いたcandidate screeningを行い、E2が発現に影響する分泌因子の同定を行ったところ、いくつかの炎症性サイトカイン類が候補因子として見つかった。現在、雄マウスからのRNAを用いて検証を行い、E2による脳梗塞部位炎症反応抑制に関与すると考えられるサイトカインの確定を試みているところである。細胞性免疫については、脳梗塞作製後7日目、14日目の組織切片を、抗CD3，CD4，CD8抗体を用いた免疫染色を行ったが、脳梗塞部位には明確なシグナルは観察されなかった。従って、光血栓性脳梗塞モデルにおける脳炎症には、Ｔ細胞の関与は薄いと考えている。

本研究では、発症後の脳梗塞の病態進行に、卵巣ホルモン及び細胞性免疫がどのように関与するか、またホルモン療法が脳梗塞の予後を左右するかを明らかにすることを目的としている。2022年度は、卵巣摘出を施した雌マウスに光血栓性脳梗塞モデルを作製し、その後7日目までエストラジオール（E2）又は溶媒を投与することで、雌マウスにおけるエストラジオールの効果を検討した。その結果、E2投与マウスではミクログリアの活性化が抑制された一方、アストロサイトの反応性が上昇していることが分かった。我々はこれまでに、光血栓性脳梗塞モデルにおいては、ミクログリアの活性とアストロサイトの反応性が逆相関することを見出しており（Kondo et al., 2022）、本結果も同様の結果を示していた。一方、光血栓性脳梗塞モデルを作製した雄マウスにE2を投与し、7日後の脳梗塞部位の状態を観察したところ、卵巣摘出雌マウスほどE2の顕著な効果は認められなかった。このことからE2の効果は卵巣ホルモン以外の性差因子により影響を受けることが分かった。卵巣摘出雌マウスの脳梗塞部位から抽出したRNAを試料としてRT-PCR法を用いたcandidate screeningを行い、E2が発現に影響する分泌因子の同定を行ったところ、いくつかの炎症性サイトカイン類が候補因子として見つかった。現在、雄マウスからのRNAを用いて検証を行い、E2による脳梗塞部位炎症反応抑制に関与すると考えられるサイトカインの確定を試みているところである。細胞性免疫については、脳梗塞作製後7日目、14日目の組織切片を、抗CD3，CD4，CD8抗体を用いた免疫染色を行ったが、脳梗塞部位には明確なシグナルは観察されなかった。従って、光血栓性脳梗塞モデルにおける脳炎症には、Ｔ細胞の関与は薄いと考えている。