A.actinomycetemcomitans線毛機能の遺伝子からの解析

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1昨年度の結果からActinobacillus actinomycetemcomitansの線毛サブユニットタンパクの遺伝子flpの下流には,5つのorfがflpと同じ向きで存在することが判明している。この5つの遺伝子(それぞれorfA,orfB,orfC,orfD,orfEと命名)の予想アミノ酸配列の解析から,次のことがわかった。・orfBがコードするタンパクは,タイプIV線毛リーダーペプチダーゼと高い相同性を示した。さらにタイプIVリーダペプチダーゼが認識するアミノ酸配列モチーフがflpとorfAのコードするタンパクのアミノ酸配列中に見出された。・orfDがコードするタンパクは,細菌菌体外分泌にかかわるタンパク群と高い相同性を示した。flpから始まる一連の遺伝子群はタイプIV線毛構成のかかわる遺伝子群である可能性が高いことが判明した。2線毛のクローニングに用いたA.actinomycetemcomtans線毛発現株304-a株と他の菌株をflpの塩基配列の違い,mRNAへの転写の違い,両面から比べてみた結果,・304-a株とそれを継代して線毛を発現しなくなった304-b株では,flpの構造遺伝子の塩基配列は上流のプロモーター領域を含めて完全に一致していた。mRNAの解析から304-b株はflpの転写開始が起こっておらず,転写開始の段階で制御されていることがわかった。・臨床分離株の1つは線毛非発現株であるが,そのflpにはフレームシフトが存在して,タンパクとしてFLPを発現できないことがわかった。すなわち線毛発現の違いにはmRNAに転写する段階での制御に基づくものと,構造遺伝子の変異に基づくものとがあることが明らかになった。