歯周病原細菌における低分子ストレスタンパク質による広範囲調節機構の解析

牙周病原菌中小分子应激蛋白的多种调节机制分析

• 批准号: 11771117
• 负责人: 大原 直也
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771117/
• 关键词: 嫌気性菌; 酸素ストレス; OxyR; 歯周疾患; 酸化ストレス; 2次元電気泳動

歯周疾患関連細菌であるPorphyromonas gingivalisを用いて偏性嫌気性菌の酸素暴露における適応機構を解明することを目的として、嫌気状態と酸素暴露下における同菌の蛋白質の発現パターンの違いをP.gingivalis381株を用いて検討した。酸素暴露下において発現量の顕著に増加する蛋白質が複数存在することを昨年度報告したが、今年度は昨年度に引続きこれらの蛋白質の同定をおこなった。その結果、ほとんどの蛋白質はすでに報告されているSOD、AhpC、TpX等の分子であった。しかし、分子量約9kDa、等電点約4.7の蛋白質についてその部分アミノ酸配列を決定したところ、これまでに報告されていない分子であることが推定された。その遺伝子から予測される分子量、等電点はそれぞれ9194.89、4.74であった。この蛋白質をPG9とした。ところで、酸素ストレスによって発現が上昇する蛋白質の遺伝子を支配するものにOxyRが知られているが、PG9の遺伝子がOxyRの支配を受けているかを検討した。P.gingivalis381株、33277株、およびそのOxyR::Tc株(oxyR欠損株)を嫌気培養後、酸素に暴露し、継時的に菌体を破砕し、RT-PCR法にてPG9のmRNA量の変化を調べた。その結果、OxyR::Tc株においても酸素暴露によりPG9のmRNA量は増加したが、親株に対してmRNA量が増加する時間が遅延することが明らかになった。このことから、PG9はOxyRの支配を部分的に受けていることが推測された。現在PG9の欠損株を作成し、酸素暴露下におけるPG9の役割を解析中である。

In order to understand the adaptive mechanisms of acid exposure in biased anaerobic bacteria using Porphyromonas gingivalis, a bacterium associated with periodontal diseases, the violation of the protein expression characteristics of anaerobic bacteria under acid exposure was investigated using P. gingivalis 381 strain. The amount of protein produced under acid exposure increased, and the protein content was determined in the same manner as in the previous year's report. The results showed that SOD, AhpC, TpX and other molecules were reported. A protein with a molecular weight of about 9kDa and an isoelectric point of about 4.7 was reported to have a partial acid alignment. The molecular weight and isoelectric point were 9194.89 and 4.74 respectively. The protein is PG9. The expression of protein and protein is increased, the expression of protein and protein is increased, and the expression of PG9 is increased. P. genivalis 381, 33277, and OxyR::Tc strains (oxyR deficient strains) were cultured under stress, and the PG9 mRNA levels were modulated by RT-PCR. Results: OxyR:Tc increased the amount of PG9 mRNA in plants exposed to the toxin, and the amount of PG9 mRNA in parent plants increased with time. This is the first time I've ever seen a woman. Now PG9's deficient plants are made, and PG9's service is analyzed under acid exposure.