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難治性根尖性歯周炎局所における血管内皮細胞の一酸化窒素合成および同阻害剤の検討

难治性根尖周炎血管内皮细胞一氧化氮合成及其抑制剂的研究

基本信息

批准号：
11771191
负责人：
武市収
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、排膿の止まらない難治性根尖性歯周炎の病態を把握する目的で、血管内皮細胞による一酸化窒素(Nitric Oxide:NO)合成能に関する病理組織学的、分子生物学的検討を行った。また、NO合成阻害剤によるNO合成の抑制効果を比較することで、治療薬としての可能性を検討することを計画した。昨年度は、難治性根尖性歯周炎患者から採取した根尖部病巣組織を試料とし、血管内皮細胞による誘導型NO合成酵素(inducible NO synthase:iNOS)の産生ならびにIL-1あるいはE-セレクチン(CD68E)の産生を確認した。本年度は血管内皮細胞を分離したのちNOならびにiNOS産生を検討し、加えてNO合成阻害剤の効果について検索したところ、以下の結果を得た。1. 臍帯静脈をコラゲナーゼ処理し、得られた細胞浮遊液から通法に従い臍帯静脈血由来血管内皮細胞(HUVEC)を採取した。2. P.gingivalis-LPS、IL-1およびインターフェロンγによる混合刺激を行ったHUVECを用いてGriess試薬または免疫染色によって検索したところ、NOならびにiNOSの産生を認めた。3. 2.の培養HUVECにL-アルギニン誘導体(L-NMMA、L-NIO)を加えたところ、コントロールに比較して著明なNO合成の低下を認めた。4. 2.で得られた培養HUVECからRNAを採取し、ヒトiNOS特異的プライマーを用いたRT-PCR法による遺伝子発現を検索したところ、そのほとんどで明らかなiNOS遺伝子の発現が確認された。

In this study, we studied the pathogenesis of periapical periodontitis and the synthesis of acidified asphyxiator (Nitric Oxide:NO) in vascular endothelial cells. The inhibition of NO synthesis and NO synthesis is better than that of the control and treatment of the possibility. Last year, patients with chronic periapical periodontitis were randomly selected to obtain tissue samples for apical disease, and vascular endothelial cell-mediated NO synthase (inducible NO synthase:iNOS) was used to detect the activity of IL-1-specific enzyme (CD68E). This year, vascular endothelial cells were isolated, NO cells were isolated, iNOS was isolated, NO synthesis was blocked, and the results were obtained in the following results. 1. The blood was collected from the endothelial cells (HUVEC) of the blood. 2. P.gingivalis-LPS, IL-1, iNOS, γ, mixed stimulation, HUVEC, Griess, immunostaining, immunostaining, iNOS, iNOS. 3. 2. HUVECL-L-NIO (L-NMMA, HUVECs) were added to show that NO synthesis was lower than normal. 4. 2. You can use the RT-PCR method to get the information that you need to HUVEC the RNA data, and use the RT-PCR method to make sure that you are not sure that you are going to get it.