神経シナプス結合部位のChapsyn110の生理機能

Chapsyn110 在神经元突触结合位点的生理功能

• 批准号: 11780494
• 负责人: 名田 茂之
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11780494/
• 关键词: PDZ; ABC transporter; Chapsyn110; リガンド

・脳の新規ABCトランスポーターのクローニング脳RNAよりABCトランスポーターに保存されている配列より作成した縮重プライマーでRT-PCRを行い、新規ABCトランスポーター遺伝子断片をクローニングした。この配列をBLASTサーチした結果、3側の配列を得ることが出来た。5側については新たな縮重プライマーを用いたPT-PCRと5RACEにより、全長cDNAクローニングに成功した。この新規ABCトランスポーターは結果的に脳と血小板で発見が見られ、特に血小板での発現が強かったことからABCAPと命名した。・ABCAPに対するモノクローン抗体の作製ABCAPのC末側40kDa程の領域を大腸菌に発現させ、これを抗原としてマウスに免役したマウスの脾細胞よりハイブリドーマを作製し、モノクローン抗体産生株3クローンを得た。これらの抗体はいずれもマウス、ラットのABCAPと反応した。このモノクローン抗体を用いてマウス・ラット組織のウエスタンブロットの結果、予想分子量と一致する250kDaの蛋白質が検出された。

New rules ABC, RT-PCR, RT-PCR, ABC fragments, fragments. If you want to match the BLAST results, you will get the results, and if you assign the column for 3 years, you will get the results. In 5 years, the new system is very important to use the PT-PCR 5RACE system, and the full-length cDNA will ensure the success of the system. For the results of the new ABC regulations, please see the platelet profile, and the special platelet test will strengthen the ABCAP name. The antibody against ABCAP was detected in the field of 40kDa at the end of the ABCAP. The antigen was detected, the antigen was immunized, the spleen cell was immunized, and the antibody was produced. The antibody was detected and the antibody was detected. The antibody was ABCAP. The antibody was detected by Elisa. The results were analyzed by tissue culture. The molecular weight of the antibody was consistent with that of the 250kDa protein.

项目成果

Nada S,Murakami S,Okamoto S,Kubo Y,Yamaguchi A: "Monoclonal Antibody That Binds to the Central Loop of the Tn10-Encoded Metal Tetracycline/H (+) Antiporter of Escherichia coli"J Biochem (Tokyo). 129. 87-91 (2001)

Nada S、Murakami S、Okamoto S、Kubo Y、Yamaguchi A：“结合 Tn10 编码金属四环素/H ( ) 大肠杆菌逆向转运蛋白中央环的单克隆抗体”J Biochem（东京）。

Ryu S,Kawabe T,Nada S,Yamaguchi A: "Identification of basic residues involved in drug export function of human multidrug resistance-associated protein 2"J Biol Chem. 275. 39617-36924 (2000)

Ryu S，Kawabe T，Nada S，Yamaguchi A：“人多药耐药相关蛋白 2 药物输出功能中涉及的基本残基的鉴定”J Biol Chem。

Kubo Y,Konishi S,Kawabe T,Nada S,Yamaguchi A: "Proximity of periplasmic loops in the metal-Tetracycline/H (+) antiporter of Escherichia coli observed on site-directed chemical cross-linking"J Biol Chem. 275. 5270-5274 (2000)

Kubo Y、Konishi S、Kawabe T、Nada S、Yamaguchi A：“在定点化学交联中观察到的大肠杆菌金属四环素/H ( ) 逆向转运蛋白中周质环的邻近性”J Biol Chem。

Iwaki S,Tamura N,Kimura-Someya T,Nada S,Yamaguchi A: "Cysteine-scanning mutagenesis of transmembrane segments 4 and 5 of the Tn10-encoded metal-tetracycline/H+ antiporter reveals a permeability barrier in the middle of a transmembrane water-filled channel

Iwaki S、Tamura N、Kimura-Someya T、Nada S、Yamaguchi A：“Tn10 编码的金属四环素/H 逆向转运蛋白的跨膜片段 4 和 5 的半胱氨酸扫描诱变揭示了跨膜水中间的渗透性屏障

Kawabuchi M,Satomi Y,Takao T,Shimonishi Y,Nada S,Nagai K,Tarakhovsky A,Okada M: "Transmembrane phosphoprotein Cbp regulates the activities of Src-family tyrosine kinases"Nature. 404. 999-1003 (2000)

Kawabuchi M、Satomi Y、Takao T、Shimonishi Y、Nada S、Nagai K、Tarakhovsky A、Okada M：“跨膜磷蛋白 Cbp 调节 Src 家族酪氨酸激酶的活性”Nature。