シーケンシャルポリペプチドを用いた細胞内への遺伝子導入

使用连续多肽将基因引入细胞

• 批准号: 11780618
• 负责人: 山岡 哲二
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Kyoto Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11780618/
• 关键词: 遺伝子キャリヤー; 非ウィルスペクター; ポリペプチド; 親水性側鎖; 強塩基性カチオン基; 高張液処理法; 哺乳類培養細胞; 遺伝子治療; 非ウィルスベクター

本研究では、分子量、化学構造、シーケンスの制御されたポリカチオン分子の新規遺伝子導入キャリヤーへの応用について検討した。合成したシーケンシャルポリペプチドとDNAとの複合体の物理化学的特性が遺伝子発現頻度を大きく左右することが明らかとなった。特に、従来から利用されているPLLの遺伝子導入効率の低さをセリン残基の導入と側鎖の3級カチオン化で飛躍的に増大させることに成功した。従来から提唱されている細胞内分布制御、特に、ライソソームから細胞質内への移行や、それに続く核への移行性を達成しただけでは遺伝子の高効率発現は誘導できない事も明らかとなった。調整したプラスミドの物理化学的特性(特に、光散乱法による密度測定、CD測定によるDNA分子の構造変化と易動性、表面ゼータ電位測定による荷電状態測定、蛍光プローブ法による複合体のコンパクションの程度の測定、等)について検討し、細胞抽出液を利用したin vitro転写・翻訳実験系によるそれら複合体の転写・翻訳の際の認識挙動との相関性について考察した。その結果、複合体のコンパクションの低さと、他のポリアニオン添加によるインターエクスチェンジ反応が遺伝子発現効率を大きく左右するファクターであることを解明できた。

In this study, the molecular weight, molecular weight, chemical production, and the preparation of the new specification of the molecular weight, molecular weight and molecular weight were analyzed. Synthesis of DNA complex physical and chemical properties, physical and chemical properties, visibility, temperature, etc. In this case, the low-level PLL residues were used to enter the high-level success rate of the three-level chemical reaction system. This is about the control of intracellular distribution, the regulation of intracellular distribution, the regulation of intracellular migration, the induction of nuclear migration, the high rate of cell migration, and the high rate of infection. The properties of physics and chemistry (characteristics, light dispersion method, chemical mobility of DNA molecules, surface temperature potential measurement, charge state measurement, photoluminescence complex, temperature measurement, etc.) of physical and chemical properties (characteristics, light scattering method, chemical density measurement, CD measurement, surface temperature potential measurement, temperature measurement, etc.) The cell extraction liquid is used to write and flip through the complex of the in vitro system and the international knowledge movement, and to compare the results of the investigation. The results, the results, the results and the results.

项目成果

T.Yamaoka,Y.Takahashi,T.Fujisato,C.W.Lee,T.Tuji,T.Ohta,A.Murakami,and Y.Kimura: "A novel adhesion prevention membrane based on a bioresorbable copoly (ester-ether) comprising poly-L-lactide and Pluronic : in vitro and in vivo evaluations"J.Biomed.Mater.Re

T.Yamaoka、Y.Takahashi、T.Fujisato、C.W.Lee、T.Tuji、T.Ohta、A.Murakami 和 Y.Kimura：“一种基于生物可吸收共聚（酯-醚）的新型防粘连膜，包含聚

A.Panitch: "Design and Biosynthesis of elastin-like artificial extracellular matrix proteins containing periodically spaced fibronectin CS5 domains"Macromolecules. 32. 1701-1703 (1999)

A.Panitch：“含有周期性间隔的纤连蛋白 CS5 结构域的弹性蛋白样人工细胞外基质蛋白的设计和生物合成”大分子。

T.Yamaoka,Y.Makita,T.Ueda,H.Sasatani,S.-I.Kim,and Y.Kimura: "Linear type azo-containing polyurethane as drug-coating material for colon-specific delivery : Its properties, degradation behavior, and drug formulation"J.Controlled Release. 66. 187-197 (2000)

T.Yamaoka、Y.Makita、T.Ueda、H.Sasatani、S.-I.Kim 和 Y.Kimura：“线性型含偶氮聚氨酯作为结肠特异性递送药物涂层材料：其性能、降解

T.Yamaoka: "Synthesis and Properties of Malic Acid-Containing Functional Polymers"Int. J. Biol. Macromol.. 25(1-3). 265-271 (1999)

T.Yamaoka：“含苹果酸的功能聚合物的合成和性能”Int。

T.Yamaoka,T.Kimura,R.Iwase,A.Murakami: "Enhanced expression of foreign gene transferred to Mammalian cells in vitro using chemically modified poly (L-1ysine) s as gene carriers"Chem.Lett. 118-119 (2000)

T.Yamaoka，T.Kimura，R.Iwase，A.Murakami：“使用化学修饰的聚（L-1赖氨酸）作为基因载体，在体外增强外源基因转移到哺乳动物细胞的表达”Chem.Lett。