低毒性遺伝子運搬体を用いて遺伝子導入法の開発と遺伝子治療への応用

低毒基因载体基因转移方法的开发及其在基因治疗中的应用

• 批准号: 07780780
• 负责人: 山岡 哲二
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kyoto Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780780/
• 关键词: ポリカチオン; 遺伝子導入; 遺伝子治療; 細胞毒性; 一過性発現頻度; ポリイオンコンプレックス; 合成ベクター; 培養動物細胞

従来から遺伝子導入法に用いられているジエチルアミノエチルデキストランの構造と細胞毒性との関係を明らかにするために、様々なジエチルアミノ基導入率、および、分子量を有するジエチルアミノエチルデキストランを合成した。それらの細胞毒性は分子量には依存せず、ジエチルアミノエチル基導入率に大きく影響された。導入率が30%以下では、細胞毒性は極めて低く、従来の導入率50%の場合の約100分の1の細胞毒性であった。しかしながら、これらの低毒性ジエチルアミノエチルデキストランを用いて細胞に導入した外来遺伝子の一過性発現頻度は、導入率が低い場合すなわち、毒性の低い場合には遺伝子の発現頻度も極めて低いことが明らかとなった。そこで、主鎖構造や側鎖構造の異なる十数種類のポリカチオンについて検討した結果、ジエチルアミノアセタール化ポリビニルアルコール、および、ジメチルアミノプロピルアクリルアミドとアクリルアミドとの共重合体が低毒性で、高効率の遺伝子発現頻度を誘導できることが明らかとなった。様々な構造を有するポリカチオンによる遺伝子導入を総合的に考察すると、遺伝子導入のための合成ベクターに要求される重要な因子として、(1)十分に高い導入率で3級(あるいは、4級)カチオン基を有すること、(2)側鎖に非電荷の親水基を有すること、などが明らかとなった。また、これら親水性基の役割が、DNA分子との間に形成されたポリイオンコンプレックスの親水性を保つことであることが示唆された。

The method was used to detect cytotoxicity, cytopathic acid, cytopathic acid and so on. Cell toxicity, molecular weight, molecular weight and molecular weight. The enrollment rate is less than 30%, the cytotoxicity is extremely low, and the cytopathic effect is about 50%. The total score is about 100%. Low toxicity, low toxicity. In this paper, the results of the experimental results, the results of the experiments, the results of the experiments, the results, and the results. The higher the rate, the higher the accuracy, the higher the accuracy. In the system, there are many important factors that are required to improve the overall performance of the system. (1) very high enrollment rate: level 3 (level 4), and (2) the non-battery based water-based system is equipped with equipment, and so on. The water-based base cutter, the DNA molecule, and the molecular weight of the water-based resin form the structure of the water-based base cutter, and the molecular weight of the water-based base cutter and the molecular weight of the molecule.

项目成果

T. Yamaoka: "Biomedical Materials Research in the Far East(II)" Yoshito Ikada and Xingdong Zhang, 2 (1996)

T. Yamaoka：《远东生物医学材料研究（II）》 Yoshito Ikada 和 Xingdong Zhang，2（1996）