植物液胞におけるタンパク質分解の解析-オートファジーのアッセイ系の開発

植物液泡中蛋白质降解分析-自噬检测系统的开发

• 批准号: 12740447
• 负责人: 野田 健司
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12740447/
• 关键词: オートファジー; 液胞; シロイヌナズナ; タンパク質分解

植物細胞を動物細胞から区別している特徴の一つは、その巨大な中心液胞の存在である。多面的なその役割の中で、分解機能の解析は殆ど進行していなかった。オートファジーは、細胞内タンパク質を液胞に送り込み、分解する現象であり、液胞分解機構の中心的な役割を担っていると目されている。本研究は、オートファジーが植物体において果たす役割を解明することを目的として開始した。酵母APG遺伝子は酵母のオートファジーに必須な遺伝子であり、その多くのホモログがシロイヌナズナにも基本的に保存されていた。タグ挿入ラインをスクリーニングし、それらホモログの中の一つAtApg9の破壊株を得た。AtApg9破壊株では、そのApApg9mRNA、タンパク質が全く発現していなかった。Atapg9-1変異株は、栄養飢餓にさらすと野性型より早期に枯死を始めた。次に、シロイヌナズナ色素体に、液胞プロテアーゼ依存的にプロセシングされるマーカータンパク質を発現させた。AtApg9破壊株では野性型株に比べて、先にプロセスされたフォームが現れた。これらのことから、栄養飢餓に伴う枯死に前後して葉緑体の分解がおこり、オートファジーがこの飢餓に対する耐性維持に重要な働きをしていることが判明した。この結果は、植物体の個体レベルで液胞分解の重要性を示したものである。

Plant cells を animal cells ら distinguishable by <s:1> て る る characteristics of <s:1> a である そ そ a huge な central liquid cell <e:1> exists である. In the multi-faceted なそ cycle of the cycle, the で and decomposition functions of the cycle are analyzed, and the <s:1> almost <e:1> is carried out for <s:1> て な な った った った. オ ー ト フ ァ ジ ー は, intracellular タ ン パ ク qualitative を vacuole に send り 込 み, decomposition す る phenomenon で あ り, vacuole decomposition institutions の な battle in the center of the cut を bear っ て い る と mesh さ れ て い る. は, this study オ ー ト フ ァ ジ ー が plant に お い て fruit た す "を cut interpret す る こ と を purpose と し て began し た. Traces of yeast APG 伝 son は yeast の オ ー ト フ ァ ジ ー に must な heritage 伝 son で あ り, そ の more く の ホ モ ロ グ が シ ロ イ ヌ ナ ズ ナ に も basic に save さ れ て い た. タ グ scions into ラ イ ン を ス ク リ ー ニ ン グ し, そ れ ら ホ モ ロ グ の の one つ AtApg9 の broken 壊 た を strains. AtApg9 broken 壊 strains で は, そ の ApApg9mRNA, タ ン パ ク qualitative が full く 発 now し て い な か っ た. The Atapg9-1 variant strains よ and 栄 are starved にさらすと wild type よ <s:1> early に death を begins めた. に, シ ロ イ ヌ ナ ズ ナ chromatophore に, vacuole プ ロ テ ア ー ゼ dependent に プ ロ セ シ ン グ さ れ る マ ー カ ー タ ン パ ク qualitative を 発 now さ せ た. The wild type of AtApg9 broke through the 壊 strain で れた and the wild type に appeared earlier than べて and にプロセスされたフォ ムが ムが ムが ムが れた. こ れ ら の こ と か ら and tech students.their ownship keep hunger に う die before and after に し て chloroplast の decomposition が お こ り, オ ー ト フ ァ ジ ー が こ の hunger に す seaborne る patient maintain に important な 働 き を し て い る こ と が.at し た. The <s:1> <s:1> results and the importance of the decomposition of liquid cells in the plant <s:1> individual レベ レベ で で を を を show that the <s:1> た <s:1> である である である である である を of the plant body <s:1> is を.

项目成果

Suzuki K, Kirisako T, Kamada Y, Mizushima N, Noda T, Ohsumi Y: "The pre-autophagosomal structure organized by concerted functions of APG genes is essential for autophagosome formation"EMBO J.. 20(21). 5971-5981 (2002)

Suzuki K、Kirisako T、Kamada Y、Mizushima N、Noda T、Ohsumi Y：“APG 基因协同功能组织的前自噬体结构对于自噬体形成至关重要”EMBO J.. 20(21)。

Kirisako,T.,Ichimura,Y.,Okada,H.,Kabeya,Y.,Mizushima,N.,Yoshimori,T.,Ohsumi,M.,Noda,T.OhsumiY: "Reversible modification regulares the memrane-binding state of Apg8/Aut7 essential for autophagy and the cytoplasm to vacuole targeting pathway"J.Cell Biol. 15

Kirisako，T.，Ichimura，Y.，Okada，H.，Kabeya，Y.，Mizushima，N.，Yoshimori，T.，Ohsumi，M.，Noda，T.OhsumiY：“可逆修饰规则了膜结合状态

Kihara,A.,Noda,T.,Ishihara,N.and Ohsumi,Y.: "Two distinct Vps34 Ptdlns 3-kinase Complexes functionin autophagy and CPY sorting in Saccharomyces cevisiae"J.Cell Biol. 152. 519-530 (2001)

Kihara,A.、Noda,T.、Ishihara,N. 和 Ohsumi,Y.：“两种不同的 Vps34 Ptdlns 3-激酶复合物在酿酒酵母的自噬和 CPY 分选中发挥作用”J.Cell Biol。

Ichimura,Y.,Kirisako,T.,Takao,T.,Satomi,Y.,Shimonishi,Y.,Ishihara,N.,Mizushima,N.,Tanida,I.,Kominami,E.,Ohsumi,M.,Noda,T.Ohsumi,Y: "A ubiquitin-like system mediates protein lipidation"Nature. 408. 488-492 (2000)

Ichimura,Y.、Kirisako,T.、Takao,T.、Satomi,Y.、Shimonishi,Y.、Ishihara,N.、Mizushima,N.、Tanida,I.、Kominami,E.、Ohsumi,M.,

Ishihara N, Hamasaki M, Yokota S, Suzuki K, Kamada Y, Kihara A, Yoshimori T, Noda T, Ohsumi Y: "Autophagosome requires specific early Sec proteins for its formation and NSF/SNARE for vacuolar fusion"Mol Biol Cell. 12(11). 3690-3702 (2000)

Ishihara N、Hamasaki M、Yokota S、Suzuki K、Kamada Y、Kihara A、Yoshimori T、Noda T、Ohsumi Y：“自噬体的​​形成需要特定的早期 Sec 蛋白，空泡融合需要 NSF/SNARE”Mol Biol Cell。