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D-アミノ酸を含有する神経ペプチド、achatin-Iの生成機構の解明

阐明含有 D-氨基酸的神经肽 achatin-I 的产生机制

基本信息

批准号：
12740464
负责人：
佐竹炎
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Suntory Institute for Bioorganic Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12740464/
关键词：
achatin-I 異性化酵素 Achatina fulica differential display pedal ganglion

项目摘要

achatin-Iはアフリカマイマイの神経節および心房から単離された強力な心臓興奮作用を持つペプチドであり、N末から2残基目にD-Pheを有することが特徴である。achatin-I中のD-Pheは前駆体中のL-Pheがプロセッシングの過程で酵素的に異性化されることによって生成すると考えられたが、ペプチド中のアミノ酸を異性化する仕組みの詳細は不明である。そこで、このような異性化を触媒とする「異性化酵素」を単離・同定し、反応機構の解明を目指した。異性化酵素はachatin-I生成に関わる酵素であるから、achatin-I遺伝子が多量に発現している組織・器官に局在している可能性が極めて高いと推定した。これまでに、研究代表者らはachatin-IのcDNAクローニングに成功しachatin-I遺伝子は食道下神経節のpedal ganglion領域のみに特異的に発現していることを、PT-PCRおよびin situ hybridization法によって突き止めた。この知見をもとに、pedal ganglionとそれ以外の領域からそれぞれRNAを抽出してdifferential display(DD)PCRを行ってpedal ganglion領域に特異的に発現している遺伝子のスクリーニングを行い、いくつかのpedal ganglion特異的発現遺伝子を得た。現在は、これらの遺伝子の全長配列を解読し、さらに遺伝子物がachatin-I異性化に関与するものか検討している。

achatin-I is characterized by strong cardiac excitation at the end of N residues. D-Phe in achatin-I is not specific to L-Phe in the process of enzyme differentiation in the precursor. "Heterogeneous enzyme" refers to the separation, identification and interpretation of the reaction mechanism. The possibility that alloenzymes are involved in the production of achatin-I is extremely high. The representative of this study was the successful development of achatin-I cDNA library and PT-PCR in situ hybridization. This knowledge can be found in the field of pedal ganglion and in the field of pedal ganglion. It can be found in the field of pedal ganglion by differential display(DD)PCR. Now, the full-length alignment of these genes is discussed, and the relationship between achatin-I heterogeneity and genetic diversity is discussed.