アフリカトリパノソーマ原虫の生活環のおける変態機構に関する研究

非洲锥虫原生动物生命周期中的变态机制研究

• 批准号: 12760208
• 负责人: 井上 昇
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12760208/
• 关键词: トリパノソーマ; 生活環; 完全生活環培養法; 単クローン抗体; 原虫

本研究計画を申請した時点で既に、in vitroで血流型虫体から昆虫型虫体に変態させたアフリカトリパノソーマ原虫を抗原とし、10クローンの単クローン抗体が作製されていた(J.Vet.Med.Sci.,62巻,1041? 1045ページ、2000年にて報告)。また、トリパノソーマ原虫昆虫型中体のcDNAライブラリーも既に製作済みであった。平成12年度にはリボゾームP0サブユニットタンパク質(P0)、ミトコンドリアHSP70および機能不明の新規遺伝子(H42)をクローニングし、全塩基配列を決定した。平成13年度は(1)血流型虫体と昆虫型虫体、2つの生活環ステージ虫体におけるP0およびミトコンドリアHSP70の転写レベルをノザンプロッティングで比較した結果、両遺伝子共にトリパノソーマの生活環ステージに関係なく同レベルで転写されていることが明らかとなった(第34回日本原生動物学会、神戸市、2001年11月16-18日発表 ; 第71回日本寄生虫学会、伊勢原市2002年3月29-30日発表予定)。(2) T7 RNAポリメラーゼ遺伝子およびテトラサイクリンリプレッサー遺伝子を導入したドランスジェニックトりパノソーマ株(TRIUM183:29-13)の昆虫型虫体を用い、P0遺伝子遺伝子およびミトコンドリアHSP70遺伝子の発現をテトラサイクリン誘導性二本鎖RNA interference法によってノックダウンした。その結果、両遺伝子のノックダウンはトリパノソーマに対して致死的でありことが明らかになった(投稿中)。得られた研究成果をまとめると、P0遺伝子はタンパク質成合成の場であるリボソームを構成するタンパク質のひとつであることから原虫生存に必修であり、原虫生活環ステージ間で恒常的に発現していたことに矛盾はない。一方、ポリパノソーマのミトコンドリアの構造と機能はその生活環において大きく変化することが明らかになっているが、本研究によってミトコンドリアHSP70遺伝子の発現が原虫生活環ステージ間で同レベルであり、同遺伝子のノックダウンによって原虫増殖が抑制されることが明らかとなり、トリパノソーマの生活環ステージ間で同レベルであり、同遺伝子のノックダウンによって原虫増殖が抑制されることが明らかとなり、トリパソ-マの生活環ステージ変換(変態)メカニズムの解明に向けての手がかりを得ることがだきたばかりか、ミトコンドリアHS70をターゲットとした抗トリパノソーマ薬開発への応用に関する重要な基礎データを得ることができた。今後の研究の発展が期待できる。

This study was conducted in vitro and in vivo for the development of antibodies against bloodstream parasites, insect parasites, and protozoan antigens. 62巻,1041? 1045 pages, 2000 report). The cDNA of insect type midbody is produced by In 2012, the list of P0, HSP70, and H42 was changed to include the list of P0, HSP70, and H42. The list of P0, HSP70, and H42 was changed to include the list of P0, H42, and H42. In 2013, the results of the comparison between (1) blood-flow insects and insect-type insects, and (2) P0 and Miitokondora HSP70's written elements using the "Proton" program were clearly stated. The relationship between the two types of insects and the unique life environment is the same.(34th Japan Protozoan Society, Kobe City, November 16-18, 2001; 71st Japan Parasitology Society, Isehara City, March 29-30, 2002). (2)Insect-type insects using T7 RNA vector vector The result of this is that the number of people who have died is not enough. The results of this research are as follows: 1. The composition of protozoa is essential for protozoan survival. 2. The existence of protozoa is always contradictory. The structure and function of HSP70 gene are different from those of HSP70 gene. In this study, HSP70 gene was developed from HSP70 gene. In addition, HSP70 gene was developed from HSP70 gene. In this study, HSP70 gene was developed from HSP70 gene. In the same way, the growth of protozoa is inhibited. The growth of protozoa is inhibited. Future research development is expected.

项目成果

Peter A,Mbati: "Suggested dosage rates of melarsoprol in the treatment of mice experimentally in fected with Trypanosoma brucei gambiense."Onderstepoort Journal of Veterinary Research. 67. 71-74 (2000)

Peter A，Mbati：“在治疗实验性感染布氏冈比亚锥虫的小鼠时，Melarsoprol 的建议剂量率。”Onderstepoort 兽医研究杂志。

Peter A,Mbati: "Comparison of PCR with parasitology and serology in the diagnosis of a low virulent strain of Trypanosoma brucei gambiense in mice."The Journal of Protozoology Research. 9・1. 10-16 (2000)

Peter A, Mbati：“PCR 与寄生虫学和血清学在小鼠布氏冈比亚低毒株诊断中的比较。原生动物学研究杂志 9·1 (2000)。

Noboru Inoue: "Novel species specific antigens of Trypanosoma congolense and their different localization among life-cycle stages."The Journal of Veterinary Medical Science. 62・10. 1041-1045 (2000)

Noboru Inoue：“刚果锥虫的新物种特异性抗原及其在生命周期阶段的不同定位。”兽医医学杂志 62・10（2000）。