リコビナントgp130を用いたニワトリIL6とLIFのクローニング
リコビナントgp130を用いたニワトリIL6とLIFのクローニング
批准号:
12760228
负责人:
堀内 浩幸
金额:
$1.41万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份:
2000
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
2000 至 2001
中文摘要
本研究では,ニワトリgp130の塩基配列をもとに,リコビナントgp130を作成し,このリコンビナントgp130に対する抗体を作製,利用することにより,gp130のリガンドであるニワトリIL-6とLIFをクローニングすることにある.本年度は昨年度,作製に成功した抗gp130抗体を用いた免疫沈降法とIL-6およびLIFのクローニングを試み,以下の成果を得た.1.作出した抗gp130抗体を用いて免疫沈降法をおこない,リコビナントgp130を特異的に単離できることを確認した.2.ニワトリ由来細胞を用いて1.と同様に免疫沈降をおこない,天然型のgp130を沈降させたが同時に多数のタンパクが沈降することがわかった.3.本研究過程で世界で初めてニワトリLIFのクローニングに成功した.4.同時に,これまでニワトリでは未解析であった血小板由来増殖因子のクローニングにも成功した.5.IL-6の断片クローニングに成功したが,ドイツのグループが先に全長を報告してしまった.6.クローニングしたLIFおよびIL-6のリコンビナント体を作製し,ニワトリ細胞に対して生物活性を持つことを明らかにした.現在,当初の目的通り,これらのリコンビナント体の有効活用系の構築を目指している.
英文摘要
本研究では,ニワトリgp130の塩基配列をもとに,リコビナントgp130を作成し,このリコンビナントgp130に対する抗体を作製,利用することにより,gp130のリガンドであるニワトリIL-6とLIFをクローニングすることにある.本年度は昨年度,作製に成功した抗gp130抗体を用いた免疫沈降法とIL-6およびLIFのクローニングを試み,以下の成果を得た.1.作出した抗gp130抗体を用いて免疫沈降法をおこない,リコビナントgp130を特異的に単離できることを確認した.2.ニワトリ由来細胞を用いて1.と同様に免疫沈降をおこない,天然型のgp130を沈降させたが同時に多数のタンパクが沈降することがわかった.3.本研究過程で世界で初めてニワトリLIFのクローニングに成功した.4.同時に,これまでニワトリでは未解析であった血小板由来増殖因子のクローニングにも成功した.5.IL-6の断片クローニングに成功したが,ドイツのグループが先に全長を報告してしまった.6.クローニングしたLIFおよびIL-6のリコンビナント体を作製し,ニワトリ細胞に対して生物活性を持つことを明らかにした.現在,当初の目的通り,これらのリコンビナント体の有効活用系の構築を目指している.
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N.Nakamura: "Construction of recombinant monoclonal antibodies from a chicken hybridoma line secreting specific antibody"Cytotechnology. 32. 191-198 (2000)
N.Nakamura:“从分泌特异性抗体的鸡杂交瘤系中构建重组单克隆抗体”细胞技术。
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
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作者:
[]
通讯作者:
T.Inoue: "Expression of chicken gp130 mRNA in various organs and cells"Proceedings of the International Veterinary Cytokine and Vaccine Conference. 1. 330-333 (2000)
T.Inoue:“鸡 gp130 mRNA 在各种器官和细胞中的表达”国际兽医细胞因子和疫苗会议记录。
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
H.Horiuchi: "Characterization and expression of three forms of cDNA encoding chicken Platelet-derived growth factor-A chain"GENE. 272. 181-190 (2001)
H.Horiuchi:“编码鸡血小板衍生生长因子-A 链的 cDNA 的三种形式的表征和表达”GENE。
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
H.Horiuchi: "Cloning and characterization of a chicken platelet-derived growth Factor B-chain cDNA"Developmental and Comparative Immunology. 26. 73-83 (2002)
H.Horiuchi:“鸡血小板衍生生长因子 B 链 cDNA 的克隆和表征”发育和比较免疫学。
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
H.Horiuchi: "cDNA cloning and mRNA expression of PDGF in chicken thrombocytes"Proceedings of the International Veterinary Cytokine and Vaccine conference. 1. 234-237 (2000)
H.Horiuchi:“鸡血小板中 PDGF 的 cDNA 克隆和 mRNA 表达”国际兽医细胞因子和疫苗会议记录。
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
共 6 条
高病原性鳥インフルエンザ感染症は自然免疫で克服する
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批准号:23K27057
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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资助金额:$8.4万
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财政年份:2024
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负责人:堀内 浩幸
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依托单位:
Syudy on highly pathogenic avian influenza infection in innate immunity
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批准号:23H02364
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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资助金额:$11.56万
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财政年份:2023
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负责人:堀内 浩幸
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依托单位:
ニワトリ栓球由来細胞増殖因子の遺伝子解析
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批准号:08760316
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项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额:$0.58万
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财政年份:1996
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负责人:堀内 浩幸
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依托单位:
国内基金
海外基金
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EGR1/gp130轴调节铁代谢在低氧微环境促宫颈癌细胞免疫逃逸中的作用及机制研究
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批准号:JCZRLH202600339
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项目类别:省市级项目
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资助金额:--
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批准年份:2026
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负责人:
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依托单位:
复方清胰汤对肠道菌群、黏膜屏障功能以及对 IL-6/gp130 信
号通路的影响机制研究
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批准号:2024JJ9528
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项目类别:省市级项目
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资助金额:--
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批准年份:2024
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负责人:易晓雷
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依托单位:
IL11-IL11Rα/GP130通过ERK信号通路促进克罗恩病爬行脂肪纤维化形成的机制研究
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批准号:--
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项目类别:青年科学基金项目
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资助金额:30万元
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批准年份:2022
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负责人:熊珊珊
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依托单位:
GP130信号阻滞CAR-T细胞耗竭的机制研究
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批准号:
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项目类别:省市级项目
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资助金额:10.0万元
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批准年份:2022
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负责人:蒋治武
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依托单位:
GP130通过JAK/STAT3和AP-1通路阻滞CAR-T细胞耗竭的机制研究
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批准号:--
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项目类别:面上项目
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资助金额:58万元
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批准年份:2021
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负责人:蒋治武
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依托单位:
IL-6/GP130信号通路介导反Warburg效应调控心肌细胞和心脏成纤维细胞间交互作用及其在糖尿病心肌病代谢重构中的机制研究
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批准号:82070396
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项目类别:面上项目
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资助金额:54.0万元
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批准年份:2020
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负责人:吕家高
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依托单位:
OSMR/gp130信号通路在心肌细胞增殖与心肌损伤修复中的作用与机制研究
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批准号:81970243
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项目类别:面上项目
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资助金额:55.0万元
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批准年份:2019
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负责人:聂宇
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依托单位:
胃癌细胞gp130信号促进肿瘤相关巨噬细胞分泌galectin-9介导胃癌免疫逃逸的机制研究
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批准号:81871926
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项目类别:面上项目
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资助金额:54.0万元
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批准年份:2018
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负责人:秦净
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依托单位:
IL-6上调3ˊ-磷酸腺苷5ˊ-磷酸硫酸合成酶2(PAPSS2)表达促进强直性脊柱炎韧带骨化的作用机制
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批准号:81701620
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项目类别:青年科学基金项目
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资助金额:20.0万元
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批准年份:2017
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负责人:郑凯迪
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依托单位:
雌激素受体结合gp130胞内结构域抑制IL-6/gp130炎症信号通路的抗动脉粥样硬化分子机制研究
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批准号:81772265
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项目类别:面上项目
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资助金额:56.0万元
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批准年份:2017
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负责人:李艳
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依托单位: