腸管出血性大腸菌O157の酸耐性機構の解析

肠出血性大肠杆菌O157耐酸机制分析

• 批准号: 12770132
• 负责人: 山篠 貴史
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770132/
• 关键词: 腸管出血性大腸菌; O157; 酸耐性; 糖鎖

研究計画に記した有機酸である酢酸に対する腸管出血性大腸菌O157(NGY9)ωの抵抗性とその分子機構について知見を得るために、以下の分子遺伝学的な解析を実施した。1 酸耐性に関与するのではないかと考えられる特定の遺伝子(rpoS及びcadB)に注目し、これらの遺伝子の変異をO157に導入して有機酸耐性との関連で解析した。その結果、NGY9は得に酢酸存在下での増殖能力が非常に高いこと、酢酸存在下での増殖能力は広範なストレス適応応答に関わるσ^Sの機能には依存していないこと、リジンデカルボキシラーゼシステム(CadBA)システムは酢酸存在下での増殖に重要な役割を果たしていることが明らかとなった。2 NGY9の染色体またはNGY9が保持しているプラスミド上にトランスポゾン(mini-TnS Tc1)をランダムに転移させNGY9が本来増殖可能であった酢酸ストレス条件下での増殖が不可能になってしまった変異株を複数株取得した。変異部位を同定し(変異遺伝子はfcl,wecA,wecB,wecGであることが判明した。)解析した結果、O157の外膜表層の糖鎖が酸耐性に重要な役割を果たすことが明らかになった。3 O157のゲノムライブラリーをk-12に導入し、酢酸環境下での増殖が亢進するクローンを取得し解析した結果、酢酸ストレスとは酢酸アニオンが細胞内に蓄積することによって引き起こされる細胞内イオンの変動であることが示唆された。

The research project is to investigate the molecular mechanism of resistance of intestinal hemorrhagic Escherichia coli O157 (NGY9)ω to organic acids, and to analyze the molecular mechanism below. 1. Analysis of the relationship between acid tolerance and organic acid tolerance in the presence of specific genes (rpoS and cadB). As a result, NGY9 has a very high reproductive ability in the presence of acetic acid, and its reproductive ability in the presence of acetic acid is dependent on its function in the presence of acetic acid. 2 The chromosome of NGY9 has also been transferred to the chromosome support (mini-TnS Tc1) of NGY9, so that NGY9, which was originally possible to grow, has become impossible to grow under acidic conditions, and multiple variants have been obtained. Different parts are the same.(Different parts are different.) Analysis results show that the sugar lock in the outer membrane of O157 is important for acid resistance. 3 O157 must be introduced into the cell, and the growth of the cell in the presence of acetic acid is analyzed.

项目成果

Kawano Y: "Proteolytic cleavage of staphylococcal exoproteins analyzed by two-dimensional gel electrophoresis"Microbiol Immunol. 45. 285-290 (2001)

Kawano Y：“通过二维凝胶电泳分析葡萄球菌外蛋白的蛋白水解切割”微生物免疫学。

Barua S: "Involvement of surface polysaccharides in the organic acid resistance of Shiga Toxin-producing Escherichia coli O157 : H7"Mol Microbiol. 43. 629-640 (2002)

Barua S：“表面多糖参与产志贺毒素大肠杆菌 O157 ：H7 的有机酸抗性”Mol Microbiol。

Kawamura-Sato K: "Postantibiotic suppression effect of macrolides on the expression of flagellin in Pseudomonas aeruginosa and Proteus mirabilis"J Infect Chemother. 7. 51-54 (2001)

Kawamura-Sato K：“大环内酯类药物对铜绿假单胞菌和奇异变形杆菌中鞭毛蛋白表达的抗生素后抑制作用”J Infect Chemother。

Chen MH: "Characterization of the RcsC → YojN → RcsB phosphorelay signaling pathway involved in capsular synthesis in Escherichia coli"Biosci Biotechnol Biochem. 65. 2364-2367 (2001)

Chen MH：“大肠杆菌荚膜合成中涉及的 RcsC → YojN → RcsB 磷酸中继信号通路的表征”Biosci Biotechnol Biochem. 65. 2364-2367 (2001)

Yokoyamu K: "Resolution of Escherichia coli O157 : H7 that contaminated radish sprouts in two outbreaks by two-dimensional gel electrophoresis"Curr Microbiol. 43. 311-315 (2001)

Yokoyamu K：“通过二维凝胶电泳解析两次爆发中污染萝卜芽的大肠杆菌 O157：H7”Curr Microbiol。