慢性心不全での腫瘍壊死因子-α変換酵素およびその調節因子に関する分子生物学的検討

肿瘤坏死因子-α转换酶及其调节因子在慢性心力衰竭中的分子生物学研究

• 批准号: 12770348
• 负责人: 佐藤 衛
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770348/
• 关键词: 心不全; 腫瘍壊死因子-α変換酵素; 腫瘍壊死因子-α; Real-time RT-PCR; Immunhistochemistry; 心筋炎; mRNA; real-time RT-PCR; 分子生物学; サイトカイン

本研究では、心筋炎による心不至症例を対象とし、心筋生検組織での心筋内腫瘍壊死因子-α(TNF)およびその調節因子である腫瘍壊死因子-α変換酵素(TACE)とToll様受容体4(TLR4)の発現について分子生物学的検討を行った。対象:心筋炎により心不全を呈した14例(男性10例、女性4例、平均年齢37±5歳)および対照5例(男性3例、女性2例、平均年齢48±15歳)より採取した心筋生検組織を対象とした。重症心筋炎症例6例(NYHA IV度)では、急性期(発症から1週間以内)およぴ治癒期(発症から4週間以上)の2回にわたり心筋生検を施行し検索した。方法:心筋内TNF、TACEおよびTLR4 mRNAの発現量はReal-time RT-PCRにより定量化した。TNF、TACEおよびTLR4蛋白の発現部位は免疫組織化学染色法により同定した。また、これらの発現と臨床指標との関連について比較検討した。結果:TNF、TACEおよびTLR4 mRNAの発現量は、対照群と比較し心筋炎群でいずれも高値を示した。心筋炎群でのTNFとTACE mRNAの発現量およびTNFとTLR4 mRNAの発現量には、正の相関を認めた。重症心筋炎例でのTNFとTACE mRNAの発現量は、2回目の心筋生検で1回目に比べ有意に減少した。TNF、TACEおよびTLR4蛋白は、いずれも心筋細胞の細胞質と間質へ浸潤した炎症性細胞(リンパ球、マクロファージ)で陽性像を認めた。TNF、TACEおよびTLR4 mRNAの発現量は、左室駆出率と負の相関を認め、左室収縮末期径と正の相関を認めた。また、TNFとTACE mRNAの発現量は、NYHA IIIおよびIV度の症例でIおよびIIと比較し有意に高値を示した。結語:心筋炎の発症には、TLR4とTACEの発現を介した腫瘍壊死因子-αのカスケードの活性化が関与していることが考えられた。また、TNF、TACEおよびTLR4の発現は、心筋炎の重症度と関連することが示唆された。

In this study, we investigated the molecular biology of the development of TLR4 and TNF-α, the regulatory factors of TLR4 and TNF-α in cardiac tissue. 14 cases (male 10 cases, female 4 cases, mean age 37±5 years) of myocarditis and 5 cases (male 3 cases, female 2 cases, mean age 48±15 years) of myocarditis were detected. 6 cases of severe myocarditis (NYHA grade IV) were performed in acute stage (onset within 1 week) and cured stage (onset more than 4 weeks). Methods: TNF, TACE and TLR4 mRNA expression in myocardium was quantified by Real-time RT-PCR. TNF, TACE and TLR4 protein expression sites were identified by immunohistochemical staining. The relationship between clinical indicators and clinical indicators is discussed. Results:TNF, TACE and TLR4 mRNA levels were significantly higher than those in the control group. The expression of TNF and TACE mRNA and the expression of TNF and TLR4 mRNA in myocarditis group are positively correlated. TNF and TACE mRNA expression in patients with severe myocarditis was significantly lower than that in patients with severe myocarditis. TNF, TACE and TLR4 proteins are present in the cytoplasm and stroma of cardiac muscle cells, and inflammatory cells are present in the cytoplasm and stroma. TNF, TACE and TLR4 mRNA levels were negatively correlated with left ventricular outflow rate and positively correlated with left ventricular end-systolic diameter. The expression of TNF-α mRNA was significantly higher in NYHA III and IV cases than in NYHA II. Conclusion: TLR4 and TACE are involved in the development of myocarditis and the activation of tumor necrosis factor-α. The development of TNF, TACE and TLR4 is associated with the severity of myocarditis.

项目成果

Satoh M, Nakamura M, Satoh H, Saitoh H, Segawa I, Hiramori K.: "Expression of tumor necrosis factor-alpha-converting enzyme and tumor necrosis factor-alpha in human myocarditis"Journal of American College of Cardiology. 36.4. 1288-2194 (2000)

Satoh M、Nakamura M、Satoh H、Saitoh H、Sekawa I、Hiramori K.：“人类心肌炎中肿瘤坏死因子-α 转换酶和肿瘤坏死因子-α 的表达”美国心脏病学会杂志。

Nakamura M, Satoh M, Kowada S, Satoh H, Tashiro A, Sato F, Masuda T, Hiramori K.: "Reversible restrictive cardiomyopathy due to light-chain deposition disease"Mayo Clinical Proceeding. 77.2. 193-196 (2001)

Nakamura M、Satoh M、Kowada S、Satoh H、Tashiro A、Sato F、Masuda T、Hiramori K.：“轻链沉积病引起的可逆性限制性心肌病”梅奥临床论文集。

Nakamura M, Yoshida H, Arakawa N, Saitoh S, Satoh M, Hiramori K.: "Effects of tumor necrosis factor-alpha on basal and stimulated endothelium-dependent vasomotion in human resistance vessel"Journal of Cardiovascular Pharmacology. 36.4. 487-492 (2000)

Nakamura M、Yoshida H、Arakawa N、Saitoh S、Satoh M、Hiramori K.：“肿瘤坏死因子-α 对人体阻力血管基础和刺激内皮依赖性血管舒缩的影响”心血管药理学杂志。

Nakamura M,Yoshida H,Arakawa N,Saitoh S,Satoh M,Hiramori K.: "Effects of tumor necrosis factor-alpha on basal and stimulated endothelium-dependent vasomotion in human resistance vessel"Journal of Cardiovascular Pharmacology. 36・4. 487-492 (2000)

Nakamura M、Yoshida H、Arakawa N、Saitoh S、Satoh M、Hiramori K.：“肿瘤坏死因子-α 对人体阻力血管基础和刺激内皮依赖性血管舒缩的影响”《心血管药理学杂志》36・4。 -492 (2000)

Satoh M, Nakamura M, Saitoh H, Satoh H, Akatsu T, Iwasaka J, Hiramori K.: "Aldosterone synthase (CYP11B2) expression and myocardial fibrosis in failing human heart"Clinical Science. 102.4. 381-386 (2002)

Satoh M、Nakamura M、Saitoh H、Satoh H、Akatsu T、Iwasaka J、Hiramori K.：“醛固酮合酶 (CYP11B2) 表达和衰竭人类心脏中的心肌纤维化”临床科学。