副腎腫瘍におけるステロイド17α-水酸化酵素発現異常のメカニズム〜核内オーファンレセプターCOUP-TF及びCOUP-TF結合蛋白の関与の検討〜

肾上腺肿瘤中类固醇17α-羟化酶异常表达的机制〜核孤儿受体COUP-TF和COUP-TF结合蛋白参与的检查〜

• 批准号: 12770620
• 负责人: 柴田 洋孝
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770620/
• 关键词: 核内受容体; COUP-TF; 副腎腫瘍; CYP17; Yeast two-hybrid system; corepressor; coactivator; SF-1; DAX-1; オーファンレセプター

昨年度までの検討により、副腎皮質および副腎皮質腫瘍において、糖質コルチコイドおよび副腎アンドロゲン産生の鍵となるステロイド17α-hydroxylase(CYP17)の発現が、核内オーファン受容体COUP-TFおよびDAX-1により制御されている可能性が強く示唆された。そこで、COUP-TFに着目し、その受容体と特異的に相互作用し、COUP-TFによる転写抑制に関与するcorepressorタンパク質を明らかにすることにより、ホルモン産生異常のメカニズムが明らかになる可能性が期待された。そこで本年度は、昨年度に作製した副腎皮質腫瘍cDNAライブラリーを用いて、核内受容体COUP-TFIと蛋白-蛋白相互作用を有するクローンのスクリーニングを行った。スクリーニングの結果、COUP-TFI,COUP-TFIIおよびSF-1と有意な相互作用を有するCIP-1(COUP-TFI-interacting protein-1)を同定することに成功した。CIP-1は、open reading frameが1.1kb cDNAであり、約18kDaの分子量を示すタンパク質であった。CIP-1は、COUP-TFIによる転写抑制を有意に増強することがCOS-1細胞におけるtransient transfection asssayにより確認された。また、大変興味深いことに、CIP-1タンパク質はライブラリーを作製したCushing症候群副腎の腫瘍部において、付随正常副腎と比べて有意に高発現を認めたことより、Cushing症候群の腫瘍部におけるホルモン産生異常に関わる可能性が示唆された。今後、この結果をもとに、CIP-1の機能解析および副腎腫瘍における役割を解明していく予定である。

In the past few years, the development of the receptor COUP-TF and DAX-1 has been strongly demonstrated. COUP-TF interaction with a specific receptor is expected to be related to the presence of a specific receptor. This year's production of pararenal cortical tumor cDNA was carried out in the middle of the nuclear receptor COUP-TFI and protein-protein interaction. COUP-TFI,COUP-TFII and SF-1 were successfully identified. CIP-1 has an open reading frame of approximately 1.1 kb and a molecular weight of approximately 18kDa. CIP-1 and COUP-TFI are intentionally enhanced by transient assay. Cushing syndrome is associated with the possibility of abnormal development of the adrenal gland, which is associated with the normal adrenal gland. In the future, the function of CIP-1 will be analyzed and the function of CIP-1 will be determined.

项目成果

柴田 洋孝: "内分泌腫瘍における核内受容体の病態生理学的意義"日本臨床. 60・2. 237-244 (2002)

Hirotaka Shibata：“内分泌肿瘤中核受体的病理生理学意义”日本临床研究 60・2（2002）。

Hirotaka Shibata: "Orphan receptors COUP-TF and DAX-1 as targets in disordered CYP17 expression in adrenocortical tumors"Endocrine Research. 26巻・4号. 1039-1044 (2000)

Hirotaka Shibata：“孤儿受体 COUP-TF 和 DAX-1 作为肾上腺皮质肿瘤中 CYP17 表达紊乱的靶标”《内分泌研究》第 26 卷，第 4 期。1039-1044 (2000)。

柴田 洋孝: "副腎皮質腫瘍における自律的ホルモン産生能"ホルモンと臨床. 49・増刊号. 16-22 (2001)

Hirotaka Shibata：“肾上腺皮质肿瘤的自主激素产生能力”激素和临床研究49/特刊16-22（2001）。

Takashi Ando: "Expression and regulation of bcl-2 family genes in human adrenocortical adenomas in comparison with adrenal hyperplasia of Cushing's disease"Endocrine Research. 26巻・4号. 853-859 (2000)

Takashi Ando：“与库欣病肾上腺增生相比，人类肾上腺皮质腺瘤中 bcl-2 家族基因的表达和调节”《内分泌研究》第 26 卷，第 4 期。853-859 (2000)。

Hirotaka Shibata: "Expression profiles of COUP-TF, DAX-1, and SF-1 in the human adrenal gland and adrenocortical tumors : Possible implications in steroidogenesis"Molecular Genetics and Metabolism. 74. 206-216 (2001)

Hirotaka Shibata：“人类肾上腺和肾上腺皮质肿瘤中 COUP-TF、DAX-1 和 SF-1 的表达谱：类固醇生成的可能影响”分子遗传学和代谢。