分子生物学的手法を用いた環境発がん物質による毒性発現機構の解析

利用分子生物学方法分析环境致癌物的毒性机制

• 批准号: 13877053
• 负责人: 友国 勝麿
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: 佐賀医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13877053/
• 关键词: 環境発がん; 多環芳香族炭化水素; DNA損傷; DNA付加体; 8-OH d G; 1-ヒドロキシピレン; 分子疫学; 遺伝子損傷; 8-ヒドロキシデオキシグアノシン; 薬物代謝酵素; 遺伝子多型; 白血球DNA

ディーゼルエンジンの排ガスやコークス炉ガス中に含まれる多環芳香族炭化水素(PAH)の多くはヒトに対して発がん性のあることが知られているが,その分子機構並びに量・反応関係に関しては不明の点が多い.本研究では,PAHへの暴露が比較的高いと思われる,某製鉄所のコークス炉作業者(約160名)を対象群に,一般作業者(約60名)をコントロール群に設定し,インフォームドコンセントを得た上で両群より少量の末梢血及びスポット尿を採取した.末梢血からは速やかにリンパ球DNAを抽出し,スポット尿と共に超低温フリーザーに保存した.これらのサンプルを適宜解凍して,PAH暴露によるDNA損傷の程度を2つのBiomarkerを用いて解析した.即ち,PAHの中間代謝物とDNA塩基との共有結合により生じるリンパ球DNA付加体量を32Pポストラベリング法により,酸化的DNA損傷の指標である8-OH d G量をECD-HPLC法により,それぞれ測定し,両者の関係を比較検討した.また,PAH暴露総量の目安として,尿中1-ヒドロキシピレン量を蛍光HPLC法により測定した.その結果,暴露群と対照群の間では,DNA付加体量,8-OH d G量及び尿中1-ヒドロキシピレン量において有意差が認められた.しかし,特に暴露群において,総暴露量の目安である尿中1-ヒドロキシピレン排泄量とリンパ球DNA付加体量との相関関係を解析すると,弱い正の相関しか認められなかった.同様に,リンパ球の8-OH d Gレベルとの間にも弱い相関しか認められなかった.更に,DNA付加体と8-OH d Gの間にも有意の相関は認められなかった.これらの結果から,発がんリスクの解析に最適なDNA損傷のBiomarkerを見出すためには,分析法を含めた更なる検討が必要である,

デ ィ ー ゼ ル エ ン ジ ン の row ガ ス や コ ー ク ス furnace ガ ス に in containing ま れ る polycyclic aromatic coking water element (PAH), more than の く は ヒ ト に し seaborne て 発 が ん sex の あ る こ と が know ら れ て い る が, そ の molecular mechanisms and び に quantity, anti 応 masato is に masato し て は unknown の が い more. This study で は, PAH へ の exposed が comparative high い と think わ れ る, one from the iron objects の コ ー ク ス furnace operators (about 160) を elephants に seaborne, general operators (about 60) を コ ン ト ロ ー に set し ル group, イ ン フ ォ ー ム ド コ ン セ ン ト を up た で struck group よ り and a small amount of の peripheral blood び ス ポ ッ ト urine を take し た. Peripheral blood か ら は speed や か に リ ン パ ball to extract DNA を し, ス ポ ッ ト urine と altogether に cryogenic フ リ ー ザ ー に save し た. こ れ ら の サ ン プ ル を suitable thawing し て, PAH exposure に よ る degree of DNA damage の を 2 つ の Biomarker を with い て parsing し た. ち namely, PAH の intermediate metabolites と DNA salt base と の mutual combination に よ り raw じ る リ ン パ ball DNA plus size 32 p ポ を ス ト ラ ベ リ ン グ method に よ り, acidification of the DNA damage の index で あ る 8 - OH d G quantity を ECD - HPLC に よ り, そ れ ぞ れ し, who struck の masato is beg し を compare 検 た. ま た, amount of PAH exposure 総 の mesh Ann と し て, urine 1 - ヒ ド ロ キ シ ピ レ ン quantity を 蛍 light HPLC に よ り determination し た. そ の as a result, the exposure group と polices according to group between の で は, DNA plus size, 8 - OH d G and 1 - ヒ び urine ド ロ キ シ ピ レ ン quantity に お い て deliberately bad が recognize め ら れ た. し か し, trevor に exposed group に お い て, exposure levels 総 の mesh Ann で あ る urine 1 - ヒ ド ロ キ シ ピ レ ン excretion と リ ン パ ball DNA plus size と の phase masato masato is を parsing す る と, weak い is の phase masato し か recognize め ら れ な か っ た. Similarly, に,リ パ パ パ spheres of 8-OH d Gレベ に と と <s:1> are related to に に weak められな and に recognize められな った った った った った. More に, DNA FuJiaTi と between 8 - OH d G の に も intentionally の phase masato は recognize め ら れ な か っ た. こ れ ら の results か ら, 発 が ん リ ス ク の parsing に optimum な DNA damage の Biomarker を shows す た め に は, analysis contains を め た more な る beg が 検 necessary で あ る,

项目成果

Ichiba M: "Lymphocyte DNA adducts and polymorphism in the DNA repair enzyme XPD"Biomarkers. 6(4). 289-293 (2001)

Ichiba M：“淋巴细胞 DNA 加合物和 DNA 修复酶 XPD 中的多态性”生物标记。

Hanaoka T: "Cytochrome P4501B1 mRNA levels in peripheral blood cells and exposure To polycyclic aromatic hydrocarbons in Chinese coke oven workers"The Science of the Total Environment. 296. 27-33 (2002)

Hanaoka T：“中国焦炉工人外周血细胞中的细胞色素 P4501B1 mRNA 水平和多环芳烃暴露”《总体环境科学》。

Jiusong Zhang: "Urinary 1-hydroxypyrene in coke oven workers relative to exposure, Alcohol consumption, and metabolic enzymes"Occupational and Environmental Medicine. 58(11). 716-721 (2001)

张久松：“焦炉工人尿1-羟基芘相对于暴露、酒精消耗和代谢酶”职业与环境医学。

Zhang J: "Leukocyte 8-hydroxydeoxyguanosine and aromatic DNA adduct in coke oven workers with polycyclic aromatic hydrocarbon exposure"International Archives of Occupational and Environmental Health. 76. 499-504 (2003)

张J：“接触多环芳烃的焦炉工人白细胞8-羟基脱氧鸟苷和芳香族DNA加合物”国际职业与环境健康档案。

Lee KH: "Multiple biomarkers study in painters in a shipyard in Korea"Mutation Research. 540. 89-98 (2003)

Lee KH：“韩国一家造船厂画家的多种生物标志物研究”突变研究。