造血前駆細胞の選択的支持能を規定する骨髄間質細胞発現分子の解析

分析骨髓基质细胞表达的决定造血祖细胞选择性支持能力的分子

• 批准号: 13877155
• 负责人: 亀岡 淳一
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13877155/
• 关键词: 骨髄間質細胞; DNA microarray; 骨髄; 間質細胞; DNAマイクロアレイ

血球分化における骨髄間質細胞と造血細胞のcell-to-cell-interactionの重要性が提唱されて久しいが、その実体は不明の点が多く、責任分子はほとんど明らかにされていない。我々は、SV40T導入Transgenic mouseより33種類の骨髄間質細胞株を樹立し、支持する造血コロニーを調べたところ、支持する造血前駆細胞のlineageに選択性が認められた。その選択性は、既知の造血因子の発現と相関を示さず、培養上清によっては再現されず、未知の細胞表面分子の関与が示唆された。そこで、DNA microarray法を利用して、このような細胞表面分子の同定を計画した。まず、赤芽球コロニー形成を支持する3種の細胞株(TBR 17,33,511)と支持しない3種の細胞株(TBR 9,184,31-2)のtotal RNAを20μgずつ抽出し、それぞれ混合してE(+)群とE(-)群とし、DNA microarray法により発現の差を調べた。その結果、7662分子中、466種類の分子がE(+)群で2倍以上の発現を示し、686種類の分子がE(-)群で2倍以上の発現を示した。前者にはIL-6(E+が7.4倍,以下同様)、heat shock protein β2(14.0倍)、cadherin-11(5.0倍)など、後者にはWnt-11(0.11倍)、IL-3受容体α(0.17倍)などが含まれていた。これらの分子の部は、E(+)群かE(-)群かどちらかに選択的に発現していることがRT-PCR法等により確認された。以上より、これらの細胞表面分子が選択的造血前駆細胞支持能を規定している可能性が強く示唆された。

Differentiation of blood cells and cell-to-cell-interaction of bone marrow mesenchymal cells and hematopoietic cells The essential elements are the されて久しいが, the その実体はUnknown のDOTが多く, and the responsible elements はほとんど明らかにされていない. I 々は, SV40T imported Transgenic mouse has established 33 types of mesenchymal cell lines, supported hematopoietic cell lineage, and supported hematopoietic pre-hematopoietic cell lineage. The nature of the selection, the correlation between known hematopoietic factors, the reproduction of the culture supernatant, and the relationship between unknown cell surface molecules are shown.そこで, DNA microarray method uses して, and このようなidentical planning of cell surface molecules. The total number of まず and Akagi コロニーformation supports 3 types of する cell lines (TBR 17,33,511) and 3 types of しない cell lines (TBR 9,184,31-2) RNA is extracted at 20 μg, mixed with E(+) group and E(-) group, and DNA microarray method is used to adjust the difference. As a result, out of 7662 molecules, 466 types of molecules have E(+) groups that are more than 2 times the size of the E(-) group, and 686 types of molecules have E(-) groups that are 2 times or more the same. The former: IL-6 (E+: 7.4 times, the same below), heat shock protein β2 (14.0 times), cadherin-11 (5.0 times) Wnt-11 (0.11 times), IL-3 receptor α (0.17 times) Wnt-11 (0.17 times) Wnt-11 contains Wnt-11.これらのmoleculeの部は、E(+)集团かE(-)集团かどちらかに选択's に発成していることがRT-PCR method and other によりconfirmationされた. The above-mentioned hematopoietic pre-hematopoietic cell support ability of the selected cell surface molecules of the above-mentioned peptides and peptides is clearly indicated by the strong possibility and possibility.