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精子形成における突然変異誘導機構の探索

精子发生突变诱导机制的探索

基本信息

批准号：
15657056
负责人：
木下和生
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

多様な抗体をつくるため、リンパ球で抗体遺伝子に突然変異を導入するAIDタンパク質は精巣にも発現しており、AIDがゲノムの多様化、ひいては、生物の進化にも関与している可能性が考えられた。AIDを線維芽細胞で発現させると、抗体遺伝子と無関係のGFP遺伝子に高頻度の突然変異が誘導されるので、マウスの精巣でGFP遺伝子に突然変異が誘導されるかどうかを観察できれば、この可能性は検証できると思われた。このGFP遺伝子はあらかじめその内部に変異が導入されており、不完全なタンパクしか発現できない。この変異部分がさらに変異して復帰すると緑色蛍光を発するタンパク質が発現する。この変異GFP遺伝子とその発現量をモニタリングするためにIRES配列を介して赤色蛍光タンパク質(dimer2)遺伝子を発現する突然変異の人工基質を作成した。この人工基質はマウス胚に導入してトランスジェニックマウスを作成するのに用いられるが、人工基質の転写レベルが高いマウス個体を効率よく選別するためにdimer2は役立つことが期待される。この人工基質をマウス受精卵に注入しトランスジェニックマウス個体を得た。精巣においてdimer2を発現するマウス系統を選別し、これとAIDトランスジェニックマウスと交配させて二重トランスジェニックマウスを得た。このマウスの精巣細胞をフローサイトメトリーにより解析したところ、GFP陽性の細胞は認められなかった。このことから線維芽細胞とは異なり、雄性生殖細胞においてはAIDによるGFP遺伝子に突然変異の頻度は高くないと考えられる。この研究の中でdimer2タンパクは精子の尾部に集積することを観察し、精子のマーカーとして有用であることを見い出した。

A variety of antibodies can be detected, and sudden changes in antibody genes can be introduced into the body. The possibility that AID must be diverse and complex has been examined. AID line cell development, antibody gene, unrelated GFP gene, high frequency of sudden change induced, its essence, GFP gene, sudden change induced, detection, possibility of detection, etc. The GFP gene is introduced into the interior of the cell, and is incomplete. The difference between the two parts is that the green light appears. The production of these different GFP molecules and their presence in different artificial substrates was studied. The artificial matrix is introduced into the system and used in the production of artificial matrix. The artificial matrix is used in the production of artificial matrix. The artificial matrix is used in the production of artificial matrix. The artificial matrix is injected into the embryo. Select the appropriate item and select the appropriate item. The cells that are positive for GFP The frequency of sudden changes in GFP gene is high in male germ cells and in female germ cells. In this study, the sperm concentration in the tail was observed, and the sperm concentration in the tail was observed.

项目成果

期刊论文数量（17）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Role of DNA polymerase theta in tolerance of endogenous and exogenous DNA damage in mouse B cells

DNA聚合酶theta在小鼠B细胞内源性和外源性DNA损伤耐受中的作用

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Genes Cells 11・2
影响因子：
0
作者：
Ukai;A.et al.
通讯作者：
A.et al.

Separate domains of AID are required for somatic hypermutation and class-switch recombination

DOI：
10.1038/ni1086
发表时间：
2004-07-01
期刊：
NATURE IMMUNOLOGY
影响因子：
30.5
作者：
Shinkura, R;Ito, S;Honjo, T
通讯作者：
Honjo, T

Ta, V.T., Nagaoka, H., Catalan, N., Durandy, A., Kinoshita, K., et al.: "AID mutant analyses indicate requirement for class-switch-specific cofactors"Nature Immunology. 4・9. 843-848 (2003)

Ta, V.T.、Nagaoka, H.、Catalan, N.、Durandy, A.、Kinoshita, K. 等人：“AID 突变分析表明需要类别转换特异性辅因子”Nature Immunology 4・9。 -848 (2003)

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Okazaki, I.M., Hiai, H., Kakazu, N., Yamada, S., Kinoshita, K., et al.: "Constitutive Expression of AID Leads to Tumorigenesis"J.Exp.Med.. 197・9. 1173-1181 (2003)

冈崎 I.M.、比合 H.、加一 N.、山田 S.、木下 K. 等：“AID 的组成型表达导致肿瘤发生”J.Exp.Med. 197・9。 1181 (2003)

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Negative regulation of activation-induced cytidine deaminase in B cells

DOI：
10.1073/pnas.0510970103
发表时间：
2006-02-21
期刊：
PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
影响因子：
11.1
作者：
Muto, T;Okazaki, IM;Honjo, T
通讯作者：
Honjo, T