腸管粘膜におけるIgA抗体産生機構の解析

肠粘膜IgA抗体产生机制分析

• 批准号: 13226047
• 负责人: 木下 和生
• 金额: --
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13226047/
• 关键词: 抗体; クラススイッチ; 粘膜固有層; AID; 環状DNA; リンパ組織; IgA; 免疫学

腸管免疫で重要な働きをするIgA抗体の産生に必要なクラススイッチ組換えがどこで起きているかを検討するためにクラススイッチ組換えを鋭敏に検出するための方法を考案した。クラススイッチ組換え時に放出される、環状DNAから転写されてできるRNA(circle transcript)をRT-PCR法により同定することができた。circle transcrisptの検出は環状DNAの検出に比して、感度と特異性において優れていた。したがって、circle transcrisptはクラススイッチ組換えを反映する良いマーカー分子であることが分かった。この検出法をもちいて、マウス腸管粘膜固有層でクラススイッチが起きているのかどうかを検討した。正常マウスの腸管粘膜固有層より単離したリンパ球はcircle transcriptを発現していた。さらに、粘膜固有層のB細胞は培養条件下でもRAG-2欠損マウスに移植された場合でもパイエル板由来のB細胞より効率よくIgAへのクラススイッチを起こした。これらの結果からB細胞は粘膜固有層においてもIgAへクラススイッチし得ることが示された。この知見はクラススイッチを起こさないAID欠損マウスにおいてIgM陽性の形質細胞が多数粘膜固有層に認められる現象を説明するものと思われる。従来、IgAへのクラススイッチはパイエル板や腸間膜リンパ節などのリンパ組織において起きていると考えられていたが、これらの実験結果は腸管粘膜固有層が免疫反応の制御にも関わっていることを明らかにした。

The method of IgA antibody production in intestinal immunity is studied. RNA(circle transcript) is determined by RT-PCR. The detection of circular transcript-like DNA results in high sensitivity and specificity. The circle transcrispt is a reflection of the circle. This method of detection is used to detect and examine the mucosa propria layer of the intestinal tract. The normal intestinal mucosa layer is isolated and the circular transcript appears. In addition, B cells from lamina propria of mucosa were cultured under the condition of RAG-2 deficiency and transplanted. The B cells from lamina propria were cultured under the condition of RAG-2 deficiency and transplanted under the condition of RAG-2 deficiency. The result is that B cells are in the lamina propria of the mucosa. This phenomenon is explained by the fact that most IgM positive cytoplasmic cells are recognized in the lamina propria of mucosa. The immune response of the intestinal mucosa propria is closely related to the immune response.

项目成果

Chen, X., Kinoshita, K., Honjo, T.: "Variable deletion and duplication at recombination junction ends: implication for staggered double-strand cleavage in class switch recombination"Proceedings of National Academy of Science U.S.A.. 98・24. 13860-13865 (20

Chen, X.、Kinoshita, K.、Honjo, T.：“重组连接端的可变删除和重复：类转换重组中交错双链裂解的含义”美国国家科学院院刊 98・24。 -13865 (20

Lee, C.G., Kinoshita, K.et al.: "Quantitative regulation of class switch recombination by switch region transcription"Journal of Experimental Medicine. 194・3. 365-374 (2001)

Lee，C.G.，Kinoshita，K.等：“开关区域转录对类别开关重组的定量调节”实验医学杂志194・3（2001）。

S.Fagarasan, K.Kinoshita, M.Muramatsu, K.Ikuta, et al.: "In situ class switching and differentiation to IgA producing cells in the gut lamina propria"Nature. 413・6856. 639-643 (2001)

S.Fagarasan、K.Kinoshita、M.Muramatsu、K.Ikuta 等：“肠道固有层中 IgA 产生细胞的原位转换和分化”Nature 413・6856（2001）。

K.Kinoshita, T.Honjo: "Linking class-switch recombination with somatic hypermutation"Nature Reviews Molecular Cell Biology. 2・7. 493-503 (2001)

K.Kinoshita，T.Honjo：“将类转换重组与体细胞超突变联系起来”《自然评论分子细胞生物学》2·7（2001）。

Kinoshita, K., Harigai, M., Muramatsu, M.et al.: "A hallmark of active class switch recombination: transcripts directed by I promoters on looped-out circular DNAs"Proceedings of National Academy of Science U.S.A.. 98・22. 12620-12623 (2001)

Kinoshita, K.、Harigai, M.、Muramatsu, M.等人：“活性类开关重组的标志：环状 DNA 上 I 启动子指导的转录本”美国国家科学院院刊 98・22 .12620-12623 (2001)