免疫グロブリン遺伝子における遺伝情報変換機構の解析

免疫球蛋白基因遗传信息转换机制分析

• 批准号: 13037020
• 负责人: 木下 和生
• 金额: $ 2.94万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13037020/
• 关键词: 抗体; クラススイッチ; 体細胞突然変異; AID; DNA組換え; RNA編集; 人工基質; 免疫学

抗体の多様性を生む機構であるクラススイッチ組換えと体細胞突然変異に必須の因子activation-induced cytidine deaminase (AID)は構造上、RNA編集酵素のファミリーに属しており、RNA編集活性があると考えられるがその作用機序は不明である。AIDの機能を解明するために、本来はクラススイッチ組換えや体細胞突然変異を起こさない線維芽細胞株NIH3T3にレトロウイルスベクターを用いてAIDを強制発現させた。テトラサイクリン誘導プロモーターにより組換え標的の転写を制御できるクラススイッチ組換えの人工基質が組込まれたNIH3T3細胞ではAIDの発現と人工基質の転写に依存して人工基質でのクラススイッチ組換えが誘導されることをフローサイトメトリーとPCR法により確認した。また、体細胞突然変異の人工基質となる変異GFP遺伝子を導入したNIH3T3細胞でも、AIDの発現と変異GFP遺伝子の転写に依存して人工基質上での突然変異が観察された。これらの人工基質上での組換えや突然変異のDNA塩基配列から見た特徴は抗体遺伝子で認められるものと共通であり、抗体遺伝子で起きている反応を再現しているものと考えられた。ごれらの実験からクラススイッチ組換えや体細胞突然変異に関与するAID以外の因子はBリンパ球のみならず、線維芽細胞においても発現していることが分かった。また、AIDによる突然変異は抗体遺伝子に限られないことも明らかとなった。

The mechanism of antibody diversity is unclear. The activation-induced cytidine deaminase (AID) is a necessary factor for somatic cell mutation. The mechanism of RNA editing activity is unclear. AID functions are explained in detail, and it is necessary to change the structure of the somatic cells. In addition, it is necessary to change the structure of the somatic cells. In addition, it is necessary to change the structure of the somatic cells. The expression of AID in NIH 3T3 cells depends on the expression of AID and the expression of AID in NIH 3T3 cells. The expression of GFP gene in NIH 3T3 cells depends on the expression of GFP gene in somatic cells. In this case, the DNA sequence of the artificial matrix was changed suddenly, and the characteristics of the antibody sequence were observed. The sudden change of somatic cells is related to factors other than AID. The Aids are different. The antibodies are different.

项目成果

Chen, X., Kinoshita, K., Honjo, T.: "Variable deletion and duplication at recombination junction ends: implication for staggered double-strand cleavage in class switch recombination"Proceedings of National Academy of Science U.S.A.. 98・24. 13860-13865 (20

Chen, X.、Kinoshita, K.、Honjo, T.：“重组连接端的可变删除和重复：类转换重组中交错双链裂解的含义”美国国家科学院院刊 98・24。 -13865 (20

Lee, C.G., Kinoshita, K.et al.: "Quantitative regulation of class switch recombination by switch region transcription"Journal of Experimental Medicine. 194・3. 365-374 (2001)

Lee，C.G.，Kinoshita，K.等：“开关区域转录对类别开关重组的定量调节”实验医学杂志194・3（2001）。

S.Fagarasan, K.Kinoshita, M.Muramatsu, K.Ikuta, et al.: "In situ class switching and differentiation to IgA producing cells in the gut lamina propria"Nature. 413・6856. 639-643 (2001)

S.Fagarasan、K.Kinoshita、M.Muramatsu、K.Ikuta 等：“肠道固有层中 IgA 产生细胞的原位转换和分化”Nature 413・6856（2001）。

Fagarasan, K.Kinoshita, M.Muramatsu, K.Ikuta, et al.: "In situ class switching and differentiation to IgA producing cells in the gut lamina propria"Nature. 413・6856. 639-643 (2001)

Fagarasan、K.Kinoshita、M.Muramatsu、K.Ikuta 等：“肠道固有层中 IgA 产生细胞的原位转换和分化”Nature 413・6856（2001）。

Yoshikawa, K., Okazaki, I., Eto, T., Kinoshita, K., Muramatsu, M.et al.: "AID enzyme-induced hypermutation in an actively transcribed gene in fibroblast"Science. 296・5575. 2033-2036 (2002)

吉川K.、冈崎I.、江藤T.、木下K.、村松M.等：“成纤维细胞中活跃转录基因的AID酶诱导的超突变”科学296・5575。 2036 (2002)