免疫グロブリンクラススイッチの分子機構解析

免疫球蛋白类别转换的分子机制分析

• 批准号: 11770169
• 负责人: 木下 和生
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770169/
• 关键词: DNA組換え; S領域; 人工基質; Bリンパ球; AID; RNA編集; 組換え酵素; 転写; スプライシング; 免疫グロブリン; クラススイッチ

CH12F3-2細胞と人工基質を用いた実験で得られた、サイトカイン刺激によりクラススイッチ組換え酵素が誘導されるという観察に基づいて、サイトカイン刺激により発現誘導される遺伝子がcDNAサブトラクション法を用い村松らにより単離された。その一つ、AID遺伝子の機能を調べるため、CH12F3-2細胞において強制発現を行なった結果、クラススイッチ組換えを促進する作用があることが判明した。さらに、AID遺伝子の生体における機能を解析するため、AID遺伝子を破壊したマウスを作成した。クラスイッチが起こる場所であるリンパ節の胚中心は存在していたが、血清中の抗体クラスを測定した結果、IgM抗体は正常化それ以上の濃度で検出されたのと対照的にクラススイッチを要するクラスの抗体(IgG,IgA)は検出されなかった。リンパ球を脾臓より単離し、LPSおよびIL-4あるいはIFN-γ刺激後の抗体産生を測定してもIgMの反応はあるがクラススイッチを要するクラスの抗体(IgG,IgA,IgE)は検出されなかった。AID欠損マウスにおいてはクラススイッチ組換えが完全に障害されていることが明らかとなった。また、意外なことに抗体の抗原に対する親和性を高める体細胞突然変異も抑制されていた。AIDはクラススイッチ組換えと体細胞突然変異におけるDNA切断反応を制御していると考えられる。AIDは構造上RNA編集酵素であるAPOBEC-1と類似しているので、RNA編集を介して組換え酵素の活性を調節している可能性が高い。AIDの標的となるRNAを単離することは組換え酵素の同定につながると考えられる。

CH12 F3-2 cells and artificial substrates were successfully induced by enzyme expression, enzyme stimulation, gene expression and cDNA purification. The function of AID gene is regulated, and the effect of stress generation and stimulation in CH12F3 -2 cells is identified. The function of AID gene is analyzed. The presence of the embryonic center of the node at the site of origin, the detection of antibody in serum, the normalization of IgM antibody, and the detection of antibody (IgG,IgA) at the concentration above the corresponding site of origin. The antibody production after IFN-γ stimulation was measured by ELISA, LPS and IL-4, and the antibody production (IgG,IgA,IgE) of IgM was measured by ELISA. AID is not good enough for you. The affinity of the antibody to the antigen is unexpectedly high, and the somatic cells are suddenly inhibited AID is the first to change the DNA structure of somatic cells. AID is highly likely to modulate the activity of RNA editing enzymes similar to APOBEC-1 in structure. AID target RNA is isolated from the genome, and the enzyme is isolated from the genome.

项目成果

K.Kinoshita et al.: "Molecular mechanism of immunoglobalin class switch recombination"Cold Spring Harbor Symposia on Quantitative Biology : Signaling&Gene Expression in the lmmune System. 64(in press). (2000)

K.Kinoshita 等：“免疫球蛋白类开关重组的分子机制”冷泉港定量生物学研讨会：信号转导

K.Kinoshita et al.: "Molecular mechanism of immunoglobulin class switch recombination"Cold Spring Harbor Symposia on Quantitative Biology : Signaling and Gene Expression in the Immune System. 64. 217-226 (1999)

K.Kinoshita 等人：“免疫球蛋白类别转换重组的分子机制”冷泉港定量生物学研讨会：免疫系统中的信号传导和基因表达。

K.Kinoshita,T.Honjo: "Unique and unprecedented recombination mechanism in class switching"Current Opinion in Immunology. 12-2. 195-198 (2000)

K.Kinoshita、T.Honjo：“类别转换中独特且前所未有的重组机制”免疫学当前观点。

K.Kinoshita,T.Honjo: "Unique and unprecedented recombination mechanisms in class switching"Curr.Opin.lmmunol.. 12・2. 195-198 (2000)

K.Kinoshita、T.Honjo：“类切换中独特且前所未有的重组机制”Curr.Opin.lmmunol.. 12・2 (2000)。

M.Muramatsu et al.: "Class switch recombination and hypermutation require activation-induced cytidine deaminase (AID), a potential RNA editing enzyme"Cell. 102. 553-63 (2000)

M.Muramatsu 等人：“类别转换重组和超突变需要激活诱导的胞苷脱氨酶 (AID)，这是一种潜在的 RNA 编辑酶”细胞。