BAC-TgMを用いたビタミンD3によるレニン遺伝子発現・血圧制御機構の解明

使用 BAC-TgM 阐明维生素 D3 的肾素基因表达和血压控制机制

• 批准号: 15658105
• 负责人: 谷本 啓司
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15658105/
• 关键词: 血圧制御; レニン; 大腸菌人工染色体; トランスジェニック・マウス; ビタミンD; BAC(大腸菌人工染色体)

本研究室では以前、内在のレニン遺伝子を欠損するマウスの作製を行った(レニン遺伝子欠損マウス)。このマウスにおいては、RA系は正常に機能せず重篤な低血圧状態となることがわかっている。次に私は昨年までの本研究成果として、レニン遺伝子の発現制御領域が正常(WT)あるいは変異型(MT)のBACDNAを用いて、トランスジェニック・マウスを作製した。同マウスの遺伝子発現解析の結果から、レニン遺伝子発現に必須の転写制御領域を見いだすことができた。そこで本年度は、レニン遺伝子欠損マウスとBACトランスジェニック・マウスを交配することにより、変異型のレニン遺伝子により、遺伝子の発現と血圧表現型をレスキューすることができるのかを検証することとした。この目的のために、内在レニン遺伝子が存在しない状態でBAC導入遺伝子を保持するレスキュー・マウスを交配により作製した。遺伝子型の解析はSouthern blot法により行なった。また、対照群としてレニン遺伝子ホモ欠損マウス(Ren-KO/Ren-KO)と、レニン遺伝子ヘテロ欠損マウス(Ren-KO/Ren-1c)とを用いた。これらのマウス(WT-BAC-Ren::Ren-KO/MT-BAC-Ren::Ren-KO)における血圧をTail-Cuff法により解析した結果、正常血圧の維持に必須のレニン遺伝子発現制御DNA領域を複数見いだすことができた。

Before the lab で は, inner の レ ニ ン heritage 伝 を son owe loss す る マ ウ ス の cropping を line っ た (レ ニ ン heritage 伝 son owe loss マ ウ ス). こ の マ ウ ス に お い て は, RA は function of normal に せ ず status tuk な low blood 圧 と な る こ と が わ か っ て い る. Time に private は yesterday in ま で の this research と し て, レ ニ ン heritage 伝 son の is suppression field が 発 the normal (WT) あ る い は - aliens (MT) の BACDNA を with い て, ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク · マ ウ ス を cropping し た. With マ ウ ス の posthumous son 伝 発 now analytical results の か ら, レ ニ ン posthumous son 伝 発 に must now の planning write suppression area を see い だ す こ と が で き た. そ こ で は this year, レ ニ ン heritage 伝 son owe loss マ ウ ス と BAC ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク · マ ウ ス を mating す る こ と に よ り, - alien の レ ニ ン posthumous son 伝 に よ り, but 伝 の 発 と blood now 圧 phenotype を レ ス キ ュ ー す る こ と が で き る の か を 検 card す る こ と と し た. こ の purpose の た め に, inner レ ニ ン posthumous son 伝 が exist し な い state で BAC import legacy 伝 the を maintain す る レ ス キ ュ ー · マ ウ ス を mating に よ り cropping し た. If there is a 伝 subtype, it will be analyzed by 伝. By using the Southern blot method, によ and なった will be used. ま た, according to the group of seaborne と し て レ ニ ン posthumous son 伝 ホ モ owe loss マ ウ ス (Ren - KO/Ren - KO) と, レ ニ ン posthumous son 伝 ヘ テ ロ owe loss マ ウ ス (Ren - KO/Ren - 1 - c) と を with い た. こ れ ら の マ ウ ス (WT - BAC - Ren: : Ren - KO/MT - BAC - Ren: : Ren - KO) に お け る blood 圧 を Tail - Cuff method に よ り parsing し た results, normal blood 圧 の must maintain に の レ ニ ン heritage 伝 son 発 を plural system royal DNA field now see い だ す こ と が で き た.

项目成果

Identification of cis-regulatory sequences in the human angiotensinogen gene using transgene coplacement and site-specific recombination

使用转基因共置和位点特异性重组鉴定人血管紧张素原基因中的顺式调节序列

• 发表时间: 2005
• 期刊: Molecular and Cellular Biology 25(8)
• 作者: Shimizu;T.;Oishi;T.;Omori;A.;Sugiura;A.;Hirota;K.;Aoyama;H.;Saito;T.;Sugaya;T.;Kon;Y.;Engel;J.D.;Fukamizu;A.;Tanimoto;K.
• 通讯作者: K.