HCV core蛋白を標的とした新たな遺伝子治療戦略の可能性

针对 HCV 核心蛋白的新基因治疗策略的可能性

• 批准号: 15659175
• 负责人: 岡上 武
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659175/
• 关键词: レトロウイルス; ベクター; 肝細胞; 肝癌; 癌遺伝子; レトロウイルs

昨年度は基礎的検討として、肝癌細胞株HuH7に対して癌遺伝子G(G)-siRNAをtransientにover-expressionさせる実験とレトロウイルスベクターによるG-siRNA導入実験を行った。Transientの発現実験では、G-siRNAがover-expressionした肝癌細胞株HuH7では、コントロールと比べてHuh7細胞数が有意に低下することが明らかとなった。その機序としては、Annexin VとsubG1陽性細胞の増加、すなわち、アポトーシスの関与が考えられた。レトロウイルスベクターによりG-siRNAを導入したHuh7細胞を用いた実験でも同様の実験結果が得られている。以上の結果より、C型肝炎ウイルス(HCV)-siRNAを発現させる実験に用いる系が確立したと考えた。従って、本年度は実際にC型肝炎ウイルス(HCV)-siRNAを肝癌細胞株で発現させる実験を計画した。すなわち、肝癌細胞株HuH7においてHCV-siRNAをtransientにover-expressionさせる実験とレトロウイルスベクターによる肝癌細胞株HuH7へのHCV-siRNA導入実験を行った。しかし、いずれの実験系においても、HCV-siRNAの発現は確認できなかった。現在、種々の肝癌細胞株PLC/PRF/5,Huh7,HepG2,HLEやその他の細胞株Hela細胞,HEK293などでHCV-siRNAを発現させるのみならず、その発現がP53やMDM2などの癌遺伝子や癌抑制遺伝子の動態に及ぼす影響を検討している。

Yesterday of annual basis は 検 と し て, liver cell lines HuH7 に し seaborne て carcinoma heritage 伝 son G (G) - siRNA を transient に over - expression さ せ る be 験 と レ ト ロ ウ イ ル ス ベ ク タ ー に よ る G - siRNA import be 験 を line っ た. Transient の 発 now be 験 で は, G - siRNA が over - expression し た liver cancer cell lines HuH7 で は, コ ン ト ロ ー ル と than べ て HuH7 cells was low が intentionally に す る こ と が Ming ら か と な っ た. そ の machine sequence と し て は, Annexin V と subG1 positive cells の raised addition, す な わ ち, ア ポ ト ー シ ス の masato and が exam え ら れ た. レ ト ロ ウ イ ル ス ベ ク タ ー に よ り G - siRNA を import し た Huh7 cells を using い た be 験 で も with others の be the result of 験 が ら れ て い る. の above results よ り, hepatitis C ウ イ ル ス (HCV) - siRNA を 発 now さ せ る be 験 に with い が る department establish し た と exam え た. 従 っ て, this year's は be interstate に hepatitis C ウ イ ル ス (HCV) - siRNA を liver cancer cell lines で 発 now さ せ る be 験 を project し た. す な わ ち, liver cell lines HuH7 に お い て HCV - siRNA を transient に over - expression さ せ る be 験 と レ ト ロ ウ イ ル ス ベ ク タ ー に よ る liver cancer cell lines HuH7 へ の HCV - siRNA import be 験 を line っ た. The にお にお て て <e:1> and the ずれ ずれ <s:1> laboratory and HCV-siRNA have been found to confirm で な な った った った. Now, kind of 々 の hepatocellular carcinoma cell line PLC/PRF / 5, Huh7, HepG2, HLE や そ の he の cell line Hela, HEK293 な ど で HCV - siRNA を 発 now さ せ る の み な ら ず, そ の 発 now が P53 や MDM2 な ど の carcinoma survived 伝 son や inhibit heritage 伝 の dynamic に and ぼ す influence を beg し 検 Youdaoplaceholder0 て る.

项目成果

Kasahara A, Okanoue T, et al.: "Interferon treatment improves survival in chronic hepatitis C patients showing biochemical as well as virological responses by preventing liver-related death"J Viral Hepat. 11(2). 148-156 (2004)

Kasahara A、Okanoue T 等人：“干扰素治疗可通过预防肝脏相关死亡来提高显示生化和病毒学反应的慢性丙型肝炎患者的生存率”J Viral Hepat。

Okanoue T, Itho Y, et al.: "Lamivudine therapy for Japanese patients with cirrhosis B"Intervirology. 46(6). 394-399 (2003)

Okanoue T、Itho Y 等人：“拉米夫定治疗日本 B 型肝硬化患者”Intervirology。

Yamaguchi K, Itoh Y, et al.: "Eengineered long terminal repeats of retroviral vectors nhance transgene expression in hepatocytes in vitro and in vivo"Mol Ther. 8(5). 796-803 (2003)

Yamaguchi K、Itoh Y 等人：“逆转录病毒载体的工程化长末端重复可增强体外和体内肝细胞中的转基因表达”Mol Ther。