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肝細胞で高発現する新しいレトロウイルスベクターの開発

开发在肝细胞中高表达的新型逆转录病毒载体

基本信息

批准号：
11877093
负责人：
岡上武
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto Prefectural University of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877093/
关键词：
レトロウイルスベクター LTR 肝臓レトロウイルス肝癌細胞株

项目摘要

SFFVp,MoMuLV,両者のキメラLTRを持つレトロウイルスベクターのマウス肝臓由来の細胞株での遺伝子発現の比較昨年の検討では、三種類の肝癌細胞株に対して、SFFVp,MoMuLV,および両者のキメラLTRをプロモーターとする10種類のCATベクターを用いてマーカー遺伝子を一過性に導入し、それぞれの転写活性を比較検討した。いくつかのキメラLTRをプロモーターとするCATベクターにおいては、MoMuLVのみならずSFFVpのLTRをプロモーターとするCATベクターよりも高い転写活性が示された。しかしながら、今回のレトロウイルスベクターによる三種類の肝癌細胞株に対するマーカー遺伝子の導入の検討では、昨年のCATベクターを用いた一過性の結果と十分に合致するような結果は得られなかった。SFFVp,MoMuLV,両者のキメラLTRを持つレトロウイルスベクターのマウス肝組織内での遺伝子発現の比較従って、SFFVpとMoMuLVの二種類レトロウイルスベクターのみにより、マウスの肝組織にin vivoで導入した遺伝子の発現を検討した。マーカー遺伝子の発現をこの2者で検討するため、新たに、LacZおよびCAT遺伝子を組み込んだレトロウイルスベクターを作成した。肝組織内でのLacZ遺伝子の発現は免疫染色の染色性で、また、肝組織内のCAT遺伝子の発現は肝組織ホモゲネート中のCAT蛋白をELISAで測定することにより比較した。LacZ染色においては、SFFVpベクターを用いた場合には、MoMuLVベクターを用いた場合に比べて高い染色性を示した。さらに、CAT蛋白のELISAにおいても、SFFVpベクターを用いた場合にはMoMuLVベクターを用いた場合に比べて高い値が示された。

SFFVp,MoMuLV, human liver cancer cell lines were detected in comparison with those of last year, three types of liver cancer cell lines were isolated, and SFFVp,MoMuLV was detected. This is the most important thing in the LTR information system. This is the most important thing in the CAT information system. As soon as the information is introduced, the writing activity is better than that. "LTR", "MoMuLV", "SFFVp", "LTR", "SFFVp", "CAT", "high writing activity", "write activity". This time, the third cell line of hepatocellular carcinoma (HCC) cell line of liver cancer (HCC) was introduced into the liver cancer cell line. Last year, the results of the CAT test were very good. SFFVp,MoMuLV, the owner