レーザーを用いた結晶核発生技術による有機・蛋白質結晶の創製

使用基于激光的晶体成核技术创建有机/蛋白质晶体

基本信息

  • 批准号:
    16656011
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.3万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2004
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2004 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究では、高強度超短パルスレーザーを溶液に集光したときに生じる局所的な非線形現象を摂動として、有機非線形光学結晶4-dimethylamino-N-methyl-4-stilbazolium Tosylate(DAST)、および蛋白質の結晶核生成を制御し、高品質の単一結晶を得る技術の確立を目指した。有機非線形光学結晶DASTの育成において、ナノ秒YAGレーザーを用いた時の結晶析出確率は約10%と低かったが、フェムト秒チタンサファイアレーザーを用いた場合、結晶析出確率は約25%に向上した。さらに、DAST溶液を過飽和状態にして1時間静置した後にレーザー照射したところ、結晶析出確率は約60%であり、飛躍的に向上することが分かった。溶液状態(分子クラスターサイズ)とレーザー照射は密接に関連していることを実証した。一方、蛋白質の結晶化においては、ナノ秒レーザーの照射に対して効果が見られず、フェムト秒レーザーの照射が有効であることが分かった。数マイクロリットルの微量蛋白質溶液にレーザーを照射する必要があるため、顕微鏡下でレーザー照射できる光学系を構築した。本システムは、蛋白質の主な結晶化手法であるハンギングドロップ蒸気拡散法やシッティングドロップ蒸気拡散法に適応した。従来は結晶化に至らない低過飽和度の溶液において、フェムト秒レーザーの照射により結晶化を実現した場合、結晶の品質が向上した。特に、結晶化が困難である膜タンパク質AcrBトランスポーターはX線回折分解能が3.5Å(従来)が2.3Åとなり、大幅に結晶品質が向上した。
This study aims to establish a technique for controlling the generation of 4-dimethylamino-N-methyl-4-stilbazolium Tosylate(DAST) and high quality single crystal in organic nonlinear optical crystals. The crystallization accuracy of organic non-linear optical crystal DAST is about 10% when it is grown and about 25% when it is used. The DAST solution is supersaturated and the crystallization rate is about 60%. The state of solution is closely related to the irradiation of molecules. On the one hand, the crystallization of protein is very difficult, and the irradiation of protein is very difficult. The number of micro-protein solution irradiation is necessary to construct the optical system. The main crystallization method of protein is the evaporation method and the evaporation method. In the past, crystallization occurred in solutions with low supersaturation, and the quality of crystallization improved. In particular, crystallization is difficult, film quality is difficult, X-ray decomposition energy is 3.5%, crystallization quality is high.

项目成果

期刊论文数量(8)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
短パルスレーザーを用いた蛋白質の結晶化
使用短脉冲激光进行蛋白质结晶
  • DOI:
  • 发表时间:
    2004
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    安達宏昭;細川陽一郎;増原宏;吉村政志;森勇介;佐々木孝友
  • 通讯作者:
    佐々木孝友
Membrane protein crystallization using laser irradiation
短パレスレーザーを用いた有機分子・蛋白質の結晶化
使用短脉冲激光结晶有机分子和蛋白质
  • DOI:
  • 发表时间:
    2004
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    細川陽一郎;安達宏昭;森勇介;佐々木孝友;増原宏
  • 通讯作者:
    増原宏
レーザー照射による蛋白質結晶成長制御
通过激光照射控制蛋白质晶体生长
  • DOI:
  • 发表时间:
    2004
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    安達宏昭;et al.
  • 通讯作者:
    et al.
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  • 通讯作者:
    増原 宏

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知道了